Application of the SSB biosensor to study in vitro transcription.
基因表达由RNA聚合酶（RNAP）催化，是生命细胞中最基本的过程之一。目前定量mRNA的方法多依赖核酸纯化，易造成产物损失和实验误差，或使用昂贵染料及高灵敏度分光光度计。本文报道了一种基于大肠杆菌单链结合蛋白（SSB）的荧光生物传感器，用于体外转录mRNA的检测。研究显示，SSB对mRNA的结合特性与其天然底物单链DNA（ssDNA...
Engineering a reagentless biosensor for single-stranded DNA to measure real-time helicase activity in Bacillus.
单链DNA结合蛋白（SSB）是细菌中普遍存在且必需的蛋白，参与DNA代谢的几乎所有过程。本研究以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）SSB为基础，构建了一种无试剂SSB荧光生物传感器，可作为枯草芽孢杆菌及近缘革兰氏阳性菌中解旋酶活性的探针。作者利用该探针在AddAB解旋酶介导的DNA解链反应中实现实时监测，并首次表征了...
Fluorescent SSB as a reagentless biosensor for single-stranded DNA.
解旋酶是一类重要的能量转换酶，通常将 ATP 水解与碱基配对核酸链的分离相偶联。研究其生化机制需要能够以不同方式监测反应进程的检测方法。本文以大肠杆菌单链 DNA 结合蛋白（SSB）为蛋白框架，构建一种用于单链 DNA（ssDNA）的无试剂荧光生物传感器。SSB 可快速、高亲和且特异性地结合 ssDNA；在该蛋白上连接荧光团后，结合...
Fluorescent single-stranded DNA binding protein as a probe for sensitive, real-time assays of helicase activity.
单链DNA（ssDNA）的形成与维持是复制、转录、修复和重组等DNA过程的关键环节。DNA解旋酶通过耦合ATP水解催化双链DNA（dsDNA）解链，使碱基暴露并进一步加工。为理解相关生物学过程，需要能够实时、高灵敏地监测解旋酶活性及其机制的探针。本文报道了一种无试剂荧光生物传感器的开发与应用，该传感器基于大肠杆菌单链DNA结合蛋白（...