CD6-mediated inhibition of T cell activation via modulation of Ras.
CD6是T细胞激活时调控信号转导的细胞表面受体之一，但其发挥共刺激还是抑制作用存在争议。当T细胞与抗原呈递细胞接触时，CD6在细胞间界面与配体CD166相互作用，其胞内尾组装由接头蛋白和效应酶构成的信号体，可能触发激活级联或调节信号强度。本研究将Jurkat E6.1 T细胞稳定转导表达野生型CD6或胞内截断突变体CD6Δcyt，并...
Integration of FRET and sequencing to engineer kinase biosensors from mammalian cell libraries.
Förster 共振能量转移（FRET）生物传感器因灵敏度有限而应用受限。本文提出一种将高通量 FRET 分选与下一代测序（FRET-Seq）相结合的策略，利用自激活 FRET（saFRET）生物传感器，直接在哺乳动物细胞大规模文库中鉴定具有不同底物序列的高灵敏激酶传感器。作者以 Fyn 和 ZAP70 激酶为对象，通过融合活性激酶...
Tyrosine 192 within the SH2 domain of the Src-protein tyrosine kinase p56
T细胞受体（TCR）结合后，Src家族激酶p56Lck磷酸化TCRζ链等组分，启动T细胞激活。Lck活性主要由Y394和Y505磷酸化调控，SH2结构域内保守的Y192功能尚不明确。作者构建LckY192E磷酸化模拟突变敲入小鼠，并对原代T细胞进行细胞和生化分析。结果显示，LckY192E与CD45结合减弱，Y505高磷酸化，支持此...
Visualizing context-dependent calcium signaling in encephalitogenic T cells in vivo by two-photon microscopy.
在实验性自身免疫性脑炎（EAE）中，自身免疫 T 细胞先在周围组织激活，再进入中枢神经系统（CNS）。途中 T 细胞经过不同微环境，接收基质细胞及有无自身抗原的信号，获得侵袭靶组织的能力。本研究在 T 细胞介导的 EAE 模型中，结合活体双光子显微镜与两种激活报告系统：FRET 钙生物传感器 Twitch1 和荧光 NFAT。体外激...
Real-Time Analysis of Calcium Signals during the Early Phase of T Cell Activation Using a Genetically Encoded Calcium Biosensor.
T细胞激活依赖于T细胞受体下游持续钙信号，但抗原呈递细胞刺激后体内钙流动力学仍不清楚。既往基于T细胞运动的研究提示，淋巴结中初始T细胞激活分为两个阶段：阶段I为与树突状细胞多次短暂接触，阶段II为稳定聚集。虽然推测阶段I存在信号，但从未直接证明。由于钙染料随时间流失限制长期活体成像，作者构建了表达改良Cameleon荧光共振能量转移...