Imaging cytosolic NADH-NAD(+) redox state with a genetically encoded fluorescent biosensor.

NADH 是电子传递中的关键代谢辅因子，但在活细胞胞质中对其进行敏感、特异检测一直困难。作者将环化置换绿色荧光蛋白 T-Sapphire 与细菌 NADH 结合蛋白 Rex 结合，构建了胞质 NADH-NAD+ 氧化还原状态的荧光生物传感器。初始构建报告 [NADH]×[H+]/[NAD+]，通过定点突变消除其 pH 敏感性。工程化...