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Detection of the First Round of Translation: The TRICK Assay.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2018 Voigt F, Eglinger J, Chao JA

定量荧光显微技术常用于回答基础生物学问题。单分子RNA成像方法使研究者能够在活细胞中直接观察mRNA生命周期的初始步骤,但调控mRNA翻译的动态机制仍不清楚。作者开发了一种RNA生物传感器,可在活细胞中以时空分辨方式评估单个mRNA转录本的翻译状态。TRICK(translating RNA imaging by coat prot...

TRICK: A Single-Molecule Method for Imaging the First Round of Translation in Living Cells and Animals.

Methods in enzymology 2016 Halstead JM, Wilbertz JH, Wippich F, Lionnet T 等 6 人

信使核糖核酸(mRNA)在细胞内的生命周期具有高度动态性。单分子荧光显微成像技术的发展使研究者能够在活细胞中直接观察 RNA 的代谢过程,而活细胞多色 RNA 成像的进步进一步提高了对 RNA 代谢细节的解析能力。本章概述了翻译 RNA 成像衣壳蛋白敲除(TRICK)RNA 生物传感器的设计与实施方法。TRICK 利用核糖体在首轮翻...

Translation. An RNA biosensor for imaging the first round of translation from single cells to living animals.

Science (New York, N.Y.) 2015 Halstead JM, Lionnet T, Wilbertz JH, Wippich F 等 7 人

活细胞单分子分析为基本生物学过程动力学提供了定量见解,但信使RNA(mRNA)翻译的动态过程仍未得到充分解析。作者开发了一种基于荧光显微镜的RNA生物传感器技术,用于报告单个mRNA分子的首轮翻译事件。该技术利用正交噬菌体PP7和MS2茎环分别标记报告转录本的编码区和3′非翻译区,并分别结合带核定位序列的PP7衣壳蛋白-GFP(NL...