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Engineering of the Ligand Specificity of Transcriptional Regulator XylS by Deep Mutational Scanning.

ACS synthetic biology 2022 Ogawa Y, Katsuyama Y, Ohnishi Y

深度突变扫描是一种蛋白质工程方法。本文将其应用于改变假单胞菌 Pseudomonas putida 转录调控因子 XylS 的配体特异性,使其识别 p-甲苯酸而非天然配体 m-甲苯酸。为此,作者使用基于抗生素抗性基因的双筛选系统,构建 xylS 突变库,将推测配体结合域(1–213 位,除第 7 位外)的每个密码子随机化,产生所有可...