Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2016
Compan V, Pelegrín P
IL-1β加工是炎症小体激活的关键标志,并驱动炎症反应启动。长期以来,Western blot和ELISA被广泛用于检测该事件,但时间分辨率有限,且不适合原位实时检测。本文描述一种生物发光共振能量转移(BRET)生物传感器,用于在活巨噬细胞中实时监测IL-1β加工,可通过酶标仪或显微镜读取。该传感器由前体白细胞介素-1β(pro-I...
Nature methods
2013
Bartok E, Bauernfeind F, Khaminets MG, Jakobs C 等 8 人
测量活细胞或生物体内的蛋白酶活性仍具挑战性。本文报道一种转基因编码生物传感器,可高灵敏、高特异报告炎症小体激活过程中 caspase-1 及其他蛋白酶的蛋白水解活性。该蛋白酶报告系统基于前体白介素-1β(pro-IL-1β)与 Gaussia 荧光素酶(GLuc)融合蛋白 iGLuc 的生物学特性:pro-IL-1β 依赖性的蛋白聚...
Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)
2012
Compan V, Baroja-Mazo A, Bragg L, Verkhratsky A 等 6 人
炎症是机体对抗感染和损伤的重要保护机制,但免疫应答失控可导致慢性炎症及相关疾病。白细胞介素-1β(IL-1β)是启动炎症的关键细胞因子,其前体 pro-IL-1β 需经 caspase-1 切割生成成熟活性形式,而 caspase-1 的激活受 NLRP3 炎症小体调控。传统 Western blot 和 ELISA 等方法无法在活...