纳米孔生物传感器 2012

pH gated glucose responsive biomimetic single nanochannels.

Chemical communications (Cambridge, England) Sun Z, Han C, Wen L, Tian D, Li H, Jiang L
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组成图示

pH gated glucose responsive biomimeti... 传感器构成示意图

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传感器类型

纳米孔生物传感器

检测对象

葡萄糖(glucose, Glu);样品基质为 0.1 M KCl 的 PBS 缓冲溶液(pH 7.38 或 4.49)

检测原理

该传感器以单纳米通道为换能器,通道内壁共价固定 3-氨基苯硼酸。葡萄糖进入通道后,其 1,2- 和 5,6-位顺式二醇与相邻两个硼酸基团形成 1:2 可逆环酯。该复合物产生空间位阻并屏蔽硼酸单元的表面负电荷,使通道内表面电荷密度降低,跨膜离子电流下降,整流比 R* 随葡萄糖浓度增加而变化。在 10^-4–10 mM 范围内,C/R* 与 C 呈线性,符合 Langmuir 吸附模型。pH 门控利用硼酸酯的 pH 依赖性:pH 7.38 时环酯形成,通道呈低电流“关”态;pH 4.49 时环酯水解、葡萄糖解离,硼酸重新暴露,回到 pH 7.38 后电流恢复为“开”态。系统无外源标记放大,主要依赖单通道表面电荷屏蔽和整流比读出。

检测灵敏度

线性范围: 10^-4–10 mM;线性方程: C/R* = 63.41037 + 3.03343 C;r^2 = 0.99462

效应效果

该通道对葡萄糖具有选择性:1 mM 葡萄糖使跨膜离子电流显著下降,而 1 mM 甘露糖、木糖、半乳糖仅引起轻微变化;在 1 mM 抗坏血酸、甘氨酸、尿素存在下无响应,抗干扰能力良好。pH 7.38 与 4.49 之间可逆切换,多次循环后传感信号无明显损失,表现出良好可逆性和稳定性。葡萄糖浓度 10^-4–10 mM 内 C/R* 线性,r^2 = 0.99462。作者认为该平台可用于模拟生物离子通道门控功能,并在环境刺激控制下实现葡萄糖识别,具有仿生传感应用潜力。

传感器的构成

  • 基底/换能器:聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET,Hostaphan RN12)单纳米通道膜,经化学刻蚀形成锥形通道,大端约600 nm、小端14–23 nm,提供离子传输路径并作为离子电流换能器。
  • 表面官能团:化学刻蚀在通道内壁产生的羧基(–COO−),作为共价连接位点并赋予通道负电荷整流特性。
  • 交联剂:EDC/NHSS,活化羧基并与 3-氨基苯硼酸的氨基形成酰胺键,实现识别元件固定。
  • 识别元件:3-氨基苯硼酸(3-ABBA),共价修饰于通道内壁,通过苯硼酸与葡萄糖顺式二醇形成可逆环酯,实现葡萄糖识别。
  • 信号标记物:无外源标记物;葡萄糖结合本身改变通道表面电荷与空间位阻,作为内禀信号变化。
  • 缓冲/电解质:0.1 M KCl 溶于 0.1 M PBS(pH 7.38 或 4.49),提供离子电流介质并调节硼酸酯形成/水解。
  • 读出:跨膜离子电流与整流比 R*(+2 V 与 -2 V 电流比),由电化学方法测量,反映通道开关状态。

中文摘要

葡萄糖代谢异常是糖尿病等疾病的重要信号,生物体常利用 pH 调控离子跨膜运输。受此启发,作者以含单离子轨道的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)膜经化学刻蚀制备锥形单纳米通道,通道内壁生成羧基,并通过 EDC/NHSS 交联反应固定 3-氨基苯硼酸(3-ABBA)。在 0.1 M KCl/PBS 体系中,利用跨膜离子电流监测通道状态。pH 7.38 时,葡萄糖与相邻硼酸基团形成 1:2 环酯,屏蔽通道表面负电荷,使电流降低呈“关”态;pH 4.49 时环酯水解、葡萄糖解离,硼酸重新暴露,回到 pH 7.38 后电流恢复呈“开”态。该通道对葡萄糖具有选择性,甘露糖、木糖、半乳糖及抗坏血酸、甘氨酸、尿素等干扰物不引起明显响应,并可在不同 pH 间可逆切换,为模拟生物离子通道门控和葡萄糖识别提供新平台。

英文摘要

The development of pH gated glucose (Glu) biosensor is of great significance to human health. Herein, we have designed a pH gated Glu responsive biomimetic nanochannel, modified with 3-aminobenzeneboronic acid. The Glu responsive property can be regulated by pH which can switch nanochannels from the "on" to "off" state.

关键词

仿生纳米通道葡萄糖传感器苯硼酸pH门控离子电流