蛋白笼纳米颗粒因尺寸均一、多价、功能可塑和生物相容性好，是构建有序功能纳米结构的理想纳米构建块。本文以嗜热菌 Aquifex aeolicus 的 lumazine synthase（AaLS）蛋白笼为模板，通过遗传工程在其表面展示 SpyTag（ST），并利用 SpyTag/SpyCatcher（ST/SC）细菌胶系统，将 β-内...
β-内酰胺酶（BlaM）检测法于1998年首次提出，是一种稳健的Förster共振能量转移（FRET）报告系统，可兼容多种常用细胞系。如今该检测已商品化，可低成本、便捷地用于需要荧光读出的实验。其常见应用是测量病毒融合，即病毒进入靶细胞后遗传物质释放入细胞质的关键步骤。该系统不仅能评估总融合水平，还可分析融合动力学。然而，文献中关于...
本文报道了一种基于达尔文生存选择的 Affibody 分子亲和力成熟策略。作者利用 β-内酰胺酶蛋白片段互补分析（PCA）系统，在大肠杆菌周质中通过目标蛋白与库成员结合驱动 β-内酰胺酶活性重建，使具有 TNFα 结合能力的克隆获得在含氨苄青霉素选择培养基中的生长优势。研究首先考察了 IPTG 诱导水平、相互作用亲和力和选择压力对系...
蛋白片段互补检测（PCA）基于不同报告蛋白，可用于监测活细胞中动态蛋白-蛋白相互作用。本研究构建基于 TEM-1 β-内酰胺酶基因分裂的 PCA 系统，用于在大肠杆菌周质中筛选特异性相互作用蛋白，并应用于从组合库中筛选结合人肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的 affibody 分子。编码约 10^9 个 affibody 库成员与 β...