Selection and maturation of antibodies by phage display through fusion to pIX.
过去二十年间，M13噬菌体展示用于抗体发现与优化已显著发展。抗体展示与筛选方法包括直接展示于pIII，或通过二硫键及卷曲螺旋适配蛋白间接展示。本文描述将Fab库展示于病毒颗粒另一端较小的pIX蛋白，并将其应用于从天然库中发现新型抗体。基于pIX介导展示的抗体筛选结果与其他体外方法相当，并可通过抗原结合噬菌体直接感染大肠杆菌高效回收，...
Monitored whole gene in vitro evolution of an anti-hRaf-1 affibody molecule towards increased binding affinity.
本文首次报道基于逐步体外分子进化的Affibody亲和力成熟：对ZRAF322全部58残基三螺旋束基因进行错误PCR（epPCR）扩增引入多样性，再用核糖体展示（RD）筛选。ZRAF322以1.9 μM KD结合人Raf-1（hRaf-1），后者是MAPK/ERK通路关键蛋白激酶。进化过程通过DNA测序和SPR生物传感器结合分析在基...
Affinity maturation of a TNFalpha-binding affibody molecule by Darwinian survival selection.
本文报道了一种基于达尔文生存选择的 Affibody 分子亲和力成熟策略。作者利用 β-内酰胺酶蛋白片段互补分析（PCA）系统，在大肠杆菌周质中通过目标蛋白与库成员结合驱动 β-内酰胺酶活性重建，使具有 TNFα 结合能力的克隆获得在含氨苄青霉素选择培养基中的生长优势。研究首先考察了 IPTG 诱导水平、相互作用亲和力和选择压力对系...
A biosensor-based characterization of the affinity maturation of the immune response against interferon-beta and correlations with neutralizing antibodies in treated multiple sclerosis patients.
本研究针对接受干扰素-β（IFN-β）治疗的多发性硬化症（MS）患者，评估18例连续治疗66至198个月患者的血清样本，利用基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器（Biacore）表征抗IFN-β抗体的亲和力成熟。Biacore通过抗原-抗体结合后解离相动力学数据反映相对抗体亲和力，解离率越低表示亲和力越高。结果显示，中和抗体阳性...