Intracellular VHHs to monitor and modulate GPCR signaling.
单域抗体片段（VHH，又称纳米抗体）因分子量小、可进入隐蔽表位，在药物研发和细胞内过程研究中具有独特优势。已有细胞内VHH主要靶向胞质蛋白或转录因子，而靶向膜蛋白、尤其是G蛋白偶联受体（GPCR）的VHH较少。GPCR参与多种生理反应，是重要治疗靶点，但其构象复杂性长期阻碍药理学与结构解析。2010年代初以来，细胞内VHH被用于稳定...
BRET-Based Biosensors to Measure Agonist Efficacies in Histamine H
组胺H1受体（H1R）是一种G蛋白偶联受体（GPCR），在组胺激活后介导过敏反应，是抗组胺药物的重要靶点。H1R主要通过异源三聚体Gq蛋白传递信号，并可被GPCR激酶（GRK）2、5和6磷酸化，从而促进β-arrestin1和/或2的招募。不同结构激动剂可能选择性激活这些胞内信号分子，即偏倚激动。为评估H1R的偏倚激动，本研究采用生...
Effector membrane translocation biosensors reveal G protein and βarrestin coupling profiles of 100 therapeutically relevant GPCRs.
单个 G 蛋白偶联受体（GPCR）可激活多条信号通路，因此开发选择性靶向治疗相关通路的药物需要能够判断特定受体激活哪些 G 蛋白和 β-arrestin 的工具。本文提出一组基于效应物向质膜转位（EMTA）的 BRET 生物传感器，用于监测 12 种 G 蛋白亚型的激活。与大多数现有检测系统不同，除 Gs 外，EMTA 不需要对受体...