Frontiers in molecular neuroscience
2013
Bhargava Y, Hampden-Smith K, Chachlaki K, Wood KC 等 8 人
基因编码生物传感器可实时解析细胞信号。作者改进基于 EGFP 的 cGMP 荧光传感器 FlincG，发现质粒转染 HEK293T 细胞后荧光弱或无，而腺病毒感染成功。测序显示两种构建体在 EGFP 域均有突变，且 C 端 17 氨基酸尾与已发表序列不同。在稳定表达 NO 激活鸟苷酸环化酶和 PDE5 的 HEK293T 细胞中，系...
Methods in enzymology
2013
Sartoretto JL, Kalwa H, Romero N, Michel T
一氧化氮（NO）和过氧化氢（H2O2）均在心肌细胞内合成，并参与心血管反应调控，但二者在心肌细胞信号中的相互关系尚不清楚。成年小鼠心肌细胞是研究活性氧与活性氮受体调控信号的重要模型，但培养存活时间短且蛋白量有限。本文利用化学传感器和生物传感器开展成年心肌细胞内 H2O2 与 NO 的活体成像研究，详细描述了适合成像的心肌细胞分离与培...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2013
Held KF, Dostmann WR
在哺乳动物细胞中实时、非侵入地成像胞内第二信使，同时保持其体内表型，需要结构精密的生物传感器。本文提供了在主动脉血管平滑肌细胞中使用单波长cGMP生物传感器δ-FlincG的方法学。δ-FlincG由含两个cGMP结合域的蛋白激酶GIα（PKGIα）调节域片段与环状置换EGFP（cpEGFP）融合而成，cGMP结合引起荧光强度变化，...