8 条结果 关键词:基因编码荧光探针 ×

A fast, high-affinity fluorescent serotonin biosensor engineered from a tick lipocalin.

Nature methods 2021 Zhang S, Li X, Zhao S, Drobizhev M 等 5 人

5-羟色胺(5-HT)是调节情绪、食欲、睡眠、学习与记忆的重要单胺类神经递质,也在外周组织中参与胃肠运动、血管收缩和胰岛素分泌等过程。为在活体系统中高时空分辨监测 5-HT 动态,作者基于软蜱 Argas monolakensis 的 5-HT 结合脂钙蛋白 AM182,通过结构引导将循环置换绿色荧光蛋白 cpGFP 插入其 loo...

GPCR-Based Dopamine Sensors-A Detailed Guide to Inform Sensor Choice for In vivo Imaging.

International journal of molecular sciences 2020 Labouesse MA, Cola RB, Patriarchi T

理解多巴胺(DA)如何编码行为,依赖于能在自由行为动物中可靠监测 DA 释放的技术。近年来,红色和绿色基因编码 DA 传感器(dLight、GRAB-DA)相继发展,可在亚秒时间分辨率、亚 μM 亲和力和高分子特异性下追踪 DA 释放动力学。结合体内成像技术的快速进步,这些传感器有望改变 DA 传感和基于 DA 的药物发现。在实验室...

Monitoring the Heavy Metal Lead Inside Living Drosophila with a FRET-Based Biosensor.

Sensors (Basel, Switzerland) 2020 Yang DM, Manurung RV, Lin YS, Chiu TY 等 7 人

铅暴露对人类健康的危害已广为人知,但含铅材料仍存在于环境中。血铅水平(BLL)是官方评估铅暴露程度的主要指标,但其“安全值”对儿童是否可靠仍存疑,且铅的毒性机制尚不清楚。为此,作者开发了一种新型基因编码荧光共振能量转移(FRET)铅生物传感器 Met-lead,并将其应用于转基因果蝇。通过 UAS-GAL4 系统,Met-lead ...

A genetically encoded fluorescent biosensor for detecting nitroreductase activity in living cancer cells.

Analytica chimica acta 2019 Xu F, Fan M, Kang S, Duan X

基因编码荧光生物传感器能够在复杂细胞环境中原位监测生化过程,具有易于导入细胞、组织和生物体并支持长期成像的优势。RNA 模拟绿色荧光蛋白(RNA mimics of GFP)是由 RNA 适配体与小分子荧光团形成的复合物,其荧光亮度可与荧光蛋白相当;荧光团在未结合特定 RNA 时不发光。本研究设计并开发了一种基于 RNA mimic...

Improved genetically-encoded, FlincG-type fluorescent biosensors for neural cGMP imaging.

Frontiers in molecular neuroscience 2013 Bhargava Y, Hampden-Smith K, Chachlaki K, Wood KC 等 8 人

基因编码生物传感器可实时解析细胞信号。作者改进基于 EGFP 的 cGMP 荧光传感器 FlincG,发现质粒转染 HEK293T 细胞后荧光弱或无,而腺病毒感染成功。测序显示两种构建体在 EGFP 域均有突变,且 C 端 17 氨基酸尾与已发表序列不同。在稳定表达 NO 激活鸟苷酸环化酶和 PDE5 的 HEK293T 细胞中,系...

Visualization of JNK activity dynamics with a genetically encoded fluorescent biosensor.

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 2010 Fosbrink M, Aye-Han NN, Cheong R, Levchenko A 等 5 人

JNK 介导的信号通路可将应激刺激和细胞因子等信号转导为凋亡、增殖、分化与炎症等功能反应。为在细胞内环境中刻画该通路的动态信息流与信号处理,作者构建了一种基因编码的荧光蛋白生物传感器 JNKAR1(JNK activity reporter),用于检测内源性 JNK 活性。该传感器基于磷酸化依赖的 FRET 变化:当 JNK 磷酸化...

Genetically encoded optical sensors for monitoring of intracellular chloride and chloride-selective channel activity.

Frontiers in molecular neuroscience 2009 Bregestovski P, Waseem T, Mukhtarov M

本综述简要讨论监测细胞内氯离子(Cl−,[Cl−]i)这一最重要生理阴离子的主要方法。由于Cl−跨膜比低(约10:1)且驱动力小,其反转电位通常接近静息电位,可靠监测需要高灵敏度探针。在多种方法中,基因编码氯指示剂最具前景。近年进展基于黄色荧光蛋白(YFP)对卤素的敏感性,YFP探针已用于不同细胞中Cl−转运的定量分析和氯选择性通道...

Monitoring of chloride and activity of glycine receptor channels using genetically encoded fluorescent sensors.

Philosophical transactions. Series A, Mathematical, physical, and engineering sciences 2008 Mukhtarov M, Markova O, Real E, Jacob Y 等 6 人

基因编码探针已成为非侵入监测离子、蛋白分布及细胞组分迁移与形成的有力工具。本文报道两种分子探针的功能表达,用于非侵入荧光监测胞内氯离子浓度([Cl]i)和甘氨酸受体(GlyR)通道功能。第一种为近期开发的蓝荧光蛋白–黄荧光蛋白(CFP–YFP)融合探针 Cl-Sensor,对 Cl- 具有较高敏感性(Kapp≈30 mM)。作者通过...