Nature methods
2021
Zhang S, Li X, Zhao S, Drobizhev M 等 5 人
5-羟色胺(5-HT)是调节情绪、食欲、睡眠、学习与记忆的重要单胺类神经递质,也在外周组织中参与胃肠运动、血管收缩和胰岛素分泌等过程。为在活体系统中高时空分辨监测 5-HT 动态,作者基于软蜱 Argas monolakensis 的 5-HT 结合脂钙蛋白 AM182,通过结构引导将循环置换绿色荧光蛋白 cpGFP 插入其 loo...
International journal of molecular sciences
2020
Labouesse MA, Cola RB, Patriarchi T
理解多巴胺(DA)如何编码行为,依赖于能在自由行为动物中可靠监测 DA 释放的技术。近年来,红色和绿色基因编码 DA 传感器(dLight、GRAB-DA)相继发展,可在亚秒时间分辨率、亚 μM 亲和力和高分子特异性下追踪 DA 释放动力学。结合体内成像技术的快速进步,这些传感器有望改变 DA 传感和基于 DA 的药物发现。在实验室...
Sensors (Basel, Switzerland)
2020
Yang DM, Manurung RV, Lin YS, Chiu TY 等 7 人
铅暴露对人类健康的危害已广为人知,但含铅材料仍存在于环境中。血铅水平(BLL)是官方评估铅暴露程度的主要指标,但其“安全值”对儿童是否可靠仍存疑,且铅的毒性机制尚不清楚。为此,作者开发了一种新型基因编码荧光共振能量转移(FRET)铅生物传感器 Met-lead,并将其应用于转基因果蝇。通过 UAS-GAL4 系统,Met-lead ...
Analytica chimica acta
2019
Xu F, Fan M, Kang S, Duan X
基因编码荧光生物传感器能够在复杂细胞环境中原位监测生化过程,具有易于导入细胞、组织和生物体并支持长期成像的优势。RNA 模拟绿色荧光蛋白(RNA mimics of GFP)是由 RNA 适配体与小分子荧光团形成的复合物,其荧光亮度可与荧光蛋白相当;荧光团在未结合特定 RNA 时不发光。本研究设计并开发了一种基于 RNA mimic...
Frontiers in molecular neuroscience
2013
Bhargava Y, Hampden-Smith K, Chachlaki K, Wood KC 等 8 人
基因编码生物传感器可实时解析细胞信号。作者改进基于 EGFP 的 cGMP 荧光传感器 FlincG,发现质粒转染 HEK293T 细胞后荧光弱或无,而腺病毒感染成功。测序显示两种构建体在 EGFP 域均有突变,且 C 端 17 氨基酸尾与已发表序列不同。在稳定表达 NO 激活鸟苷酸环化酶和 PDE5 的 HEK293T 细胞中,系...
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
2010
Fosbrink M, Aye-Han NN, Cheong R, Levchenko A 等 5 人
JNK 介导的信号通路可将应激刺激和细胞因子等信号转导为凋亡、增殖、分化与炎症等功能反应。为在细胞内环境中刻画该通路的动态信息流与信号处理,作者构建了一种基因编码的荧光蛋白生物传感器 JNKAR1(JNK activity reporter),用于检测内源性 JNK 活性。该传感器基于磷酸化依赖的 FRET 变化:当 JNK 磷酸化...
Frontiers in molecular neuroscience
2009
Bregestovski P, Waseem T, Mukhtarov M
本综述简要讨论监测细胞内氯离子(Cl−,[Cl−]i)这一最重要生理阴离子的主要方法。由于Cl−跨膜比低(约10:1)且驱动力小,其反转电位通常接近静息电位,可靠监测需要高灵敏度探针。在多种方法中,基因编码氯指示剂最具前景。近年进展基于黄色荧光蛋白(YFP)对卤素的敏感性,YFP探针已用于不同细胞中Cl−转运的定量分析和氯选择性通道...
Philosophical transactions. Series A, Mathematical, physical, and engineering sciences
2008
Mukhtarov M, Markova O, Real E, Jacob Y 等 6 人
基因编码探针已成为非侵入监测离子、蛋白分布及细胞组分迁移与形成的有力工具。本文报道两种分子探针的功能表达,用于非侵入荧光监测胞内氯离子浓度([Cl]i)和甘氨酸受体(GlyR)通道功能。第一种为近期开发的蓝荧光蛋白–黄荧光蛋白(CFP–YFP)融合探针 Cl-Sensor,对 Cl- 具有较高敏感性(Kapp≈30 mM)。作者通过...