Imaging the coordination of multiple signalling activities in living cells.
细胞信号转导发生在复杂且冗余的相互作用网络中，最理想的研究方式是在同一活细胞中同步监测多个组分的激活动态。近年来，生物传感器技术的进展使人们能够在同一活细胞内可视化并定量多个网络节点的激活状态。遗传编码的荧光共振能量转移（FRET）生物传感器、正交荧光蛋白对以及荧光寿命成像显微镜（FLIM）显著提高了实验多重化的能力，使两个甚至三个...
The scaffold protein Shoc2/SUR-8 accelerates the interaction of Ras and Raf.
Shoc2/SUR-8 作为 Ras 和 Raf 的支架蛋白正向调控 Ras/ERK MAP 激酶信号。本研究利用基于荧光共振能量转移（FRET）的生物传感器并结合计算模型，考察 Shoc2 在 Ras 时空调控中的作用。在表皮生长因子（EGF）刺激的 HeLa 细胞中，RNA 介导的 Shoc2 敲低使 MEK 和 ERK 磷酸化...
Dynamic visualization of signal transduction in living cells: from second messengers to kinases.
信号转导研究因遗传编码FRET生物传感器的快速发展而发生范式转变。这类传感器利用一对适合FRET的荧光蛋白，将激酶磷酸化或第二信使浓度变化等信号事件转化为融合蛋白的构象变化，并通过供体与受体荧光强度比的变化进行实时检测。激酶活性报告器通常由激酶特异性底物、磷酸氨基酸结合域和两侧荧光蛋白组成；第二信使传感器则依赖配体结合域在结合Ca2...
6-O-sulfation of heparan sulfate differentially regulates various fibroblast growth factor-dependent signalings in culture.
硫酸乙酰肝素（HS）通过与肝素结合生长因子相互作用调控其生物活性，这种作用依赖硫酸化模式和糖醛酸异构体结构。HS 6-O-硫酸化由三种 HS6-O-硫酸基转移酶催化。作者构建了 HS6ST-1 和/或 HS6ST-2 缺陷小鼠。取自 E14.5 双敲除（dKO）小鼠的胚胎成纤维细胞（MEF）产生的 HS 几乎不含 6-O-硫酸基，而...