Litmus-Body: A Molecularly Targeted Sensor for Cell-Surface pH Measurements.
精确测量受体周围局部pH对于阐明疾病表型中局部酸化如何导致受体功能异常至关重要,但现有pH传感器难以定位并靶向特定受体分子。本文报道了一种重组蛋白pH传感器Litmus-body,其将抗IgG纳米抗体TP1107与pH敏感绿色荧光蛋白cfSEP及长Stokes位移红色荧光蛋白mCyRFP1融合,可搭载IgG抗体靶向细胞表面特定蛋白。...
精确测量受体周围局部pH对于阐明疾病表型中局部酸化如何导致受体功能异常至关重要,但现有pH传感器难以定位并靶向特定受体分子。本文报道了一种重组蛋白pH传感器Litmus-body,其将抗IgG纳米抗体TP1107与pH敏感绿色荧光蛋白cfSEP及长Stokes位移红色荧光蛋白mCyRFP1融合,可搭载IgG抗体靶向细胞表面特定蛋白。...
小窝是内皮细胞内吞和跨细胞运输胰岛素、白蛋白等大分子的主要途径。小窝介导内吞依赖Src依赖性caveolin-1(Cav-1)磷酸化,以及dynamin-2和filamin A(FilA)的招募,分别促进囊泡断裂和运输。本研究检测RalA和磷脂酶D(PLD)信号对小窝介导内吞和运输的调控。白蛋白刺激人肺微血管内皮细胞后数分钟内激活R...
代谢型γ-氨基丁酸B受体(GABAB)细胞表面稳定性调控机制仍不清楚。与许多G蛋白偶联受体不同,GABAB不经历激动剂促进的内吞,而是组成性内吞并快速下调。作者以GABAB(1b)第二胞内环为诱饵进行酵母双杂交筛选,鉴定出泛素特异性蛋白酶14(USP14)与其相互作用。利用生物发光共振能量转移(BRET)泛素化探针,在活细胞中检测到...
D1型多巴胺受体是中枢神经系统多巴胺能信号的主要介导者。激动剂激活后,D1受体可快速内化,但这一过程的功能意义长期不明。本研究在HEK293细胞和原代纹状体神经元中,利用实时荧光成像与FRET型cAMP生物传感器(Epac1-cAMPs),同步分析D1受体转运与cAMP积累动力学。结果显示,多巴胺或D1选择性激动剂SKF81297可...
本文报道了活细胞内吞过程中生物力学应力的直接测量方法。作者将荧光染料掺杂的聚苯乙烯微球作为微型远程光学传感器,利用回音壁模式(WGM)作为换能机制。在微球被人脐静脉内皮细胞逐步内吞的过程中,通过连续监测 WGM 共振,可以确定微球所经历的机械变形,其表现为共振峰展宽和蓝移,并据此推算细胞对微球施加的应力。结果表明,内吞过程中出现的应...