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Development of the fluorescent biosensor hCalmodulin (hCaM)L39C-monobromobimane(mBBr)/V91C-mBBr, a novel tool for discovering new calmodulin inhibitors and detecting calcium.

Journal of medicinal chemistry 2011 Gonzalez-Andrade M, Rivera-Chavez J, Sosa-Peinado A, Figueroa M 等 6 人

本文构建了一种新型、敏感且特异的人钙调蛋白(hCaM)荧光生物传感器 hCaM L39C-mBBr/V91C-mBBr。该传感器可用于在溶液中检测具有相反荧光信号的配体,即钙离子(Ca2+)和钙调蛋白抑制剂。作者将该装置成功应用于分析 Ca2+ 对三氟哌嗪(TFP)结合 CaM 的变构效应:Ca2+ 的表观解离常数 Kd 为 0.2...

An alternative assay to discover potential calmodulin inhibitors using a human fluorophore-labeled CaM protein.

Analytical biochemistry 2009 González-Andrade M, Figueroa M, Rodríguez-Sotres R, Mata R 等 5 人

本文报道了一种用于发现潜在钙调蛋白(CaM)抑制剂的荧光检测新方法。作者通过定点突变将人钙调蛋白第124位甲硫氨酸替换为半胱氨酸,获得 hCaM M124C,并经疏水交换层析和阳离子交换层析纯化。随后用硫醇反应性荧光探针单溴双咪胺(mBBr)共价修饰 Cys124,得到 hCaM M124C–mBBr。该标记蛋白在远紫外圆二色和 C...