8 条结果 关键词:单细胞检测 ×

The FIRE biosensor illuminates iron regulatory protein activity and cellular iron homeostasis.

Cell reports methods 2025 Sangokoya C

铁是生命必需元素,参与能量代谢、DNA代谢、线粒体功能与氧运输等关键过程;其稳态失衡可引发铁毒性、缺铁、氧化损伤和铁死亡。哺乳动物中,铁调节蛋白(IRP)通过结合mRNA非翻译区的铁响应元件(IRE)调控铁摄取、储存、输出和血红素合成相关转录本,是细胞铁稳态的核心传感器。然而,早期胚胎发育中IRP活性与细胞铁状态如何动态变化并影响细...

Recording γ-secretase activity in living mouse brains.

bioRxiv : the preprint server for biology 2024 Hou SS, Ikegawa Y, Kwon Y, Wieckiewicz N 等 9 人

γ-secretase 在中枢神经系统中发挥关键作用。我们近期开发的遗传编码 Förster 共振能量转移(FRET)生物传感器,已能在培养活神经元中逐细胞记录 γ-secretase 活性,但其在体内的调控机制仍不清楚。本研究采用近红外(NIR)C99 720-670 生物传感器和 NIR 共聚焦显微镜,在活体小鼠脑内定量记录单个...

Development of a CRISPR-Cas-Based Biosensor for Rapid and Sensitive Detection of 8-Oxoguanine DNA Glycosylase.

Analytical chemistry 2022 Zhang Q, Zhao S, Tian X, Qiu JG 等 5 人

8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶对维持基因组稳定性至关重要,其活性异常可扰乱DNA损伤修复并增加致癌致畸风险。本文构建基于CRISPR-Cas的荧光生物传感器,用于快速灵敏检测8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶。该传感器采用发夹探针,将二次链置换扩增(SDA)与CRISPR/Cas12a效应器结合,40 min内等温完成。酶存在时,PNK辅助...

A STING-based biosensor affords broad cyclic dinucleotide detection within single living eukaryotic cells.

Nature communications 2020 Pollock AJ, Zaver SA, Woodward JJ

循环二核苷酸(CDNs)是存在于三大生命域中的第二信使,在真核生物中参与先天免疫防御,并在自身免疫疾病中发挥病理作用。尽管其生物学功能广泛,现有CDN检测方法仍有限。本研究基于小鼠STING的CDN结合域进行结构导向设计,构建了一种基于Förster共振能量转移(FRET)的荧光生物传感器BioSTING。重组BioSTING可实时...

A modified exponential amplification reaction (EXPAR) with an improved signal-to-noise ratio for ultrasensitive detection of polynucleotide kinase.

Chemical communications (Cambridge, England) 2019 Zhang YP, Cui YX, Li XY, Du YC 等 6 人

针对传统指数扩增反应(EXPAR)因 SYBR Green I 对引物、模板及副产物非特异结合而导致背景高、信噪比差的问题,本文提出一种改进的 EXPAR 策略,构建无标记、一锅法荧光生物传感器,用于超灵敏检测多聚核苷酸激酶(PNK)活性。该体系以含 3'-磷酸末端的 T&P 寡核苷酸为底物,其兼具 EXPAR 引物与模板功能;T4...

Development of a single-cell GlxR-based cAMP biosensor for Corynebacterium glutamicum.

Journal of biotechnology 2017 Schulte J, Baumgart M, Bott M

环磷酸腺苷(cAMP)在许多物种中作为第二信使发挥调控作用。在工业模式菌谷氨酸棒杆菌中,cAMP是全局转录调控因子GlxR的效应物,cAMP-GlxR复合物可激活或抑制约200个靶基因表达。膜结合III类腺苷酸环化酶CyaB由ATP合成cAMP,但菌内可能还存在未知cAMP合成酶;近期已鉴定cAMP磷酸二酯酶CpdA,可催化cAMP...

Highly sensitive detection of telomerase using a telomere-triggered isothermal exponential amplification-based DNAzyme biosensor.

Chemical communications (Cambridge, England) 2014 Zhang Y, Wang LJ, Zhang CY

本文开发了一种端粒触发等温指数扩增(EXPAR)DNAzyme生物传感器,用于高灵敏检测癌细胞中的端粒酶活性,甚至达到单细胞水平。该传感器以TS引物为端粒酶识别底物,端粒酶在其3′端添加端粒重复序列后,触发Bst 2.0 WarmStart DNA聚合酶与Nt.BspQI切口酶介导的EXPAR,指数释放8-17 DNAzyme。随后...

荧光生物传感器 端粒酶DNAzymeEXPAR分子信标

Detection of bacteria using fluorogenic DNAzymes.

Journal of visualized experiments : JoVE 2012 Aguirre SD, Ali MM, Kanda P, Li Y

食源性和医院获得性病原体暴发每年造成大量死亡、住院和经济损失,因此需要能在最早阶段准确识别致病菌的分析方法。理想检测应具备高特异性、高灵敏度(可检测单个活菌)、短出结果时间、操作简便和成本低。传统微生物学方法需数天至数周;PCR 和抗体方法较快,但依赖昂贵试剂或复杂设备。作者研究 DNAzyme 作为分子探针用于细菌检测。DNAzy...