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Experimental pathology by intravital microscopy and genetically encoded fluorescent biosensors.

Pathology international 2020 Matsuda M, Terai K

双光子激发显微镜的发明扩大了活体显微镜(IVM)在实验病理学中的应用潜力。近年来,基于荧光蛋白的遗传编码生物传感器为在活体动物中可视化细胞功能提供了理想工具。本文首先简要回顾双光子激发显微镜下的活体显微镜技术,以及基于 Förster 共振能量转移(FRET)原理的遗传编码生物传感器。随后,作者描述利用这些生物传感器开展活体成像如何...

Quantitative two-photon imaging of fluorescent biosensors.

Current opinion in chemical biology 2015 Yellen G, Mongeon R

荧光生物传感器现已常规用于完整组织的双光子显微镜成像,例如脑片和活体动物脑。然而,多数研究测量的是时间变化,例如神经元活动引起的钙瞬变,而非经校准的生物传感器占据率(即被测分析物水平)。真正的定量测量具有挑战性,因为难以或无法在体内原位校准传感器的剂量–响应关系,也难以将组织中的光学信号与体外校准信号进行比较。双波长比率测量会受激光...

Fluorescence resonance energy transfer imaging of cell signaling from in vitro to in vivo: basis of biosensor construction, live imaging, and image processing.

Development, growth & differentiation 2013 Aoki K, Kamioka Y, Matsuda M

荧光蛋白成像技术的进步揭示了发育生物学中的多种生物过程。特别是基于荧光共振能量转移(FRET)原理的遗传编码生物传感器,已被用于在活细胞中可视化胞内信号分子的空间与时间动态。然而,高灵敏度FRET生物传感器的开发及其在发育生物学中的应用仍具挑战,限制了其广泛使用。本综述首先概述FRET生物传感器成像的一般流程与实验技巧,随后介绍FR...