外泌体是存在于多种生物流体中的纳米囊泡，因可携带母细胞来源的蛋白、核酸等活性分子，成为癌症等疾病无创诊断的潜在生物标志物。然而，外泌体尺寸小、组成复杂且异质性强，分离与检测困难，需要系统的分子表征才能用于常规诊断。本研究探索以肽作为抗体的低成本、高稳定替代识别元件，用于外泌体结合。作者利用噬菌体展示技术筛选可特异性结合乳腺癌来源外泌...
猫传染病是猫常见健康问题及死亡主要原因，早期诊断对治疗至关重要。IgG水平常反映个体对特定病原的免疫状态，特异性抗猫IgG抗体是检测试剂盒的关键组分。本研究利用噬菌体展示技术筛选结合猫IgG的单链可变片段（scFv）。以纯化猫IgG为靶标进行三轮生物筛选，并通过间接酶联免疫吸附试验（ELISA）筛选出结合能力最佳的两个scFv克隆。...
牛腹泻是全球牛业造成重大经济损失的重要问题，牛轮状病毒（Bovine Rotavirus, BRV）因传播性和感染性强而成为关键病原。本研究开发了一种基于亲和肽的电化学快速检测方法，用于 BRV 的早期检测。通过噬菌体展示技术从随机 12 肽库中筛选获得 BRV 特异性肽，并化学合成该肽；合成肽在 C 端引入半胱氨酸和柔性连接子，通...
Caspase-3是半胱氨酸依赖性蛋白酶，被认为是凋亡相关疾病诊断与预后可靠分子标志物。本研究报道一种基于M13噬菌体的电化学生物传感器，用于通过敏感、特异检测caspase-3评估细胞凋亡。首先利用M13噬菌体库（环肽形式）进行噬菌体展示筛选，获得潜在亲和肽展示噬菌体克隆，序列为CPTTMWRYC。经酶联免疫吸附试验表征其结合亲和...
C反应蛋白（CRP）是感染、组织损伤和愈合过程中需要准确定量的炎症生物标志物。纳米抗体因生产成本低、易于工程化且可在捕获表面形成更高结合物密度，有望替代传统抗体用于免疫诊断。本研究从同一非免疫羊驼纳米抗体库出发，比较两种独立筛选策略：一种仅采用噬菌体展示，另一种先进行一轮噬菌体展示，再进行一轮酵母展示。两种策略部分收敛，均获得两个相...
猪圆环病毒2型（PCV2）是猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）的主要病原，给全球养猪业造成重大经济损失，因此快速检测 PCV2 对疫病防控至关重要。本研究利用噬菌体展示技术，以 PCV2 衣壳蛋白为抗原，从人源 scFv phagemid 文库（Tomlinson I+J）中筛选抗 PCV2 衣壳的单链可变片段（scFv）。84 个单...
本文综述了以噬菌体替代抗体构建生物传感器的研究进展，重点介绍病毒生物电阻器（Virus BioResistor, VBR）的开发。M13噬菌体可通过噬菌体展示技术在其表面展示抗体片段或肽配体，具有成本低、热稳定性好、不易聚集等优势，但完整病毒颗粒无法直接替代现有抗体传感器中的识别元件。作者提出将M13病毒嵌入导电聚合物聚(3,4-乙...
为有效、便捷地检测病原菌，本研究开发了一种基于亲和肽的无标记生物传感器，用于识别目标菌株并实现精确定量检测。研究通过噬菌体展示肽库生物筛选，获得一种对大肠杆菌O157:H7具有较高结合亲和力的12肽；该肽在C端引入三个甘氨酸（G3）和一个半胱氨酸（C）残基，可自组装于金电极表面，从而构建亲和肽修饰电极。结合电化学阻抗谱（EIS），该...
登革热病毒2型非结构蛋白1（DENV2 NS1）是登革热诊断中特异且敏感的蛋白生物标志物。本研究采用多价噬菌体展示技术从M13随机肽库中筛选可特异性结合NS1的亲和肽，并通过循环伏安法（CV）和电化学阻抗谱（EIS）表征其结合行为。筛选得到序列为EHDRMHAYYLTR的R3#10噬菌体展示肽，其富含组氨酸和精氨酸等碱性残基。与NS...
军团菌是广泛存在于自然和人工水系统中的革兰阴性菌，人吸入含菌气溶胶后可感染肺泡巨噬细胞，引发军团病。由于军团菌普遍存在且危害健康，饮用水中军团菌浓度必须严格监测，但标准方法仍依赖耗时的培养与形态分析。本研究首次从人源 naïve HAL 抗体库通过噬菌体展示获得抗 L. pneumophila 抗体，并在完整细菌细胞上筛选，以选择特...
幼年特发性关节炎（JIA）目前缺乏特异性诊断标志物，诊断主要依赖临床表现和排除性血液检查。为筛选能识别多种JIA亚型循环自身抗体的新表位抗原（模拟表位），作者用JIA患者血清纯化IgG筛选噬菌体展示随机七肽库，并通过ELISA验证所选肽对JIA患者、健康儿童及其他自身免疫病患者血清IgG的免疫反应性。融合于噬菌体颗粒的PRF+1肽能...
本研究开发了一种基于肌红蛋白特异性结合肽的简单、高灵敏电化学生物传感器，用于急性心肌梗死早期诊断。通过噬菌体展示筛选得到 Myo-3R7 肽（CPSTLGASC，838 Da），其可特异性结合肌红蛋白。该肽通过双硫代双（琥珀酰亚胺基丙酸酯）（DSP）自组装单层共价固定于金电极表面，并用荧光微阵列扫描和循环伏安法确认固定。以 Fe(C...
本文提出一种快速开发蛋白生物传感器的平台：利用 M13 噬菌体展示筛选能结合目标蛋白的短无序肽，化学合成后固定于金表面，采用电化学阻抗谱（EIS）检测目标；石英晶体微天平（QCM）用于开发过程中的诊断。作者以肝毒性标志物丙氨酸氨基转移酶（ALT）为例，经生物筛选获得新肽 ALT5-8（WHWRNPDFWYLK），表达该肽的噬菌体对固...
噬菌体展示技术虽在生物传感器中应用较少，但可为癌症标志物等分析物提供可定制的识别支架。本章介绍将病毒直接共价固定于电极、实现无试剂实时检测的完整方案。首先利用大库噬菌体展示筛选获得能结合前列腺特异性膜抗原（PSMA）的M13噬菌体；随后以硫辛酸N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS-TE）修饰金电极，使噬菌体表面游离胺与活化酯形成酰胺键，实现...