Biosensors & bioelectronics
2020
Barbosa C, Silveira CM, Silva D, Brissos V 等 7 人
本研究以固定化来自 Pseudomonas putida MET94 的染料脱色过氧化物酶(PpDyP)及其三个定向进化(DE)变体为对象,旨在开发用于过氧化氢(H2O2)检测的生物传感器。通过共振拉曼(RR)和表面增强共振拉曼(SERR)光谱考察酶在溶液及固定化状态下的结构性质,并通过电化学方法分析其电催化性能。野生型(wt)和 ...
Biosensors & bioelectronics
2013
Arango Gutierrez E, Mundhada H, Meier T, Duefel H 等 6 人
葡萄糖氧化酶(GOx)对β-D-葡萄糖具有高特异性和高稳定性,适合糖尿病护理中的葡萄糖检测,但其活性强烈依赖氧气,可能导致安培法β-D-葡萄糖测定不准确。作者以GOx变体T30V I94V为起点,采用醌二亚胺介体,通过SeSaM和易错PCR两轮随机突变、单点饱和突变以及OmniChange四位点同时饱和突变进行定向进化,并建立基于醌...
Applied biochemistry and biotechnology
2011
Yu EH, Prodanovic R, Güven G, Ostafe R 等 5 人
本研究对葡萄糖氧化进行了电化学表征,比较了由定向蛋白质进化获得的突变葡萄糖氧化酶 B11-GOx 与野生型葡萄糖氧化酶 wt-GOx 在溶液及酶聚合物电极中的性能。实验采用循环伏安法、线性扫描伏安法和计时电流法,在含二茂铁介体的磷酸缓冲液以及固定于聚(乙烯基二茂铁-co-2-羟乙基甲基丙烯酸酯) 膜上的酶电极体系中考察葡萄糖氧化电流...
Journal of biotechnology
2008
Rosini E, Molla G, Rossetti C, Pilone MS 等 6 人
测定食品和生物样品中D-氨基酸含量具有重要意义。本研究开发了一种基于红发酵母(Rhodotorula gracilis)黄素酶D-氨基酸氧化酶(RgDAAO)的生物传感器。为使D-氨基酸组成不改变检测结果,作者同时采用野生型及通过理性设计和定向进化获得的突变体。对D-氨基酸氧化酶突变体在不同中性、酸性和碱性底物比例混合物中的活性分析...