Recent advances in FRET-Based biosensors for biomedical applications.
荧光共振能量转移(FRET)生物传感器是生物医学、药理学、毒理学和食品科学中广泛使用的有效分析工具。其核心机制是供体荧光团受激发后,通过偶极-偶极相互作用将能量非辐射转移至受体,从而实现细胞过程、分子组分和生物相互作用的比率成像。多种FRET传感器已在活细胞、组织和生物体中揭示病理状态的基础机制,并与现有生物分析技术结合,实现准确、...
荧光共振能量转移(FRET)生物传感器是生物医学、药理学、毒理学和食品科学中广泛使用的有效分析工具。其核心机制是供体荧光团受激发后,通过偶极-偶极相互作用将能量非辐射转移至受体,从而实现细胞过程、分子组分和生物相互作用的比率成像。多种FRET传感器已在活细胞、组织和生物体中揭示病理状态的基础机制,并与现有生物分析技术结合,实现准确、...
荧光生物传感器现已常规用于完整组织的双光子显微镜成像,例如脑片和活体动物脑。然而,多数研究测量的是时间变化,例如神经元活动引起的钙瞬变,而非经校准的生物传感器占据率(即被测分析物水平)。真正的定量测量具有挑战性,因为难以或无法在体内原位校准传感器的剂量–响应关系,也难以将组织中的光学信号与体外校准信号进行比较。双波长比率测量会受激光...
本章首先简要介绍荧光与荧光共振能量转移(FRET)的基本原理,随后重点讨论记录FRET最常用的方法,尤其关注广泛用于生物传感器成像的显微镜技术。文中比较了宽场荧光显微镜与激光扫描共聚焦显微镜的仪器选择,说明基于强度(如比率成像、受体光漂白)和基于供体荧光寿命(FLIM)的FRET检测方式,并给出将特定记录方法与具体科学实验相匹配的指...