毕赤酵母（Komagataella phaffii）因高分泌能力广泛用于异源蛋白生产，但高产工程菌株筛选仍是限制步骤。尽管已有分子工具箱用于构建设计和基因整合，转化子克隆变异高，常发生多拷贝和随机整合，因此需对数百个转化子进行功能筛选。常规筛选多基于深孔板培养，并对诱导后样品进行免疫印迹或酶活测定，且每种蛋白常需定制检测。本文开发通...
蚊子依靠嗅觉定位宿主并吸血，驱避剂通过干扰气味识别的生化级联发挥作用，是控制蚊媒疾病传播的高效、低成本手段。然而，传统驱避剂发现依赖嗅觉仪等行为学实验，速度慢、通量低且易出错。为此，作者构建了一种原型全细胞生物传感器，用于快速、准确检测可改变蚊子行为的化合物，尤其是驱避剂。作为概念验证，他们通过遗传工程使毕赤酵母 Pichia pa...
无细胞蛋白合成（CFPS）因合成生物学发展而重新受到关注，不同宿主裂解液可利用细胞内生物合成、蛋白折叠和翻译后修饰能力。本文报道了一种基于毕赤酵母（Pichia pastoris，Komagataella phaffi）的 CFPS 平台。作者构建了新型核糖体生物传感器，将核糖体相关基因启动子与 sfGFP 报告基因融合，通过流式细...
本研究对甲基营养酵母毕赤酵母（Pichia pastoris）进行单细胞分析，开发了一种用于检测异源酶产生甲醇的生物传感器。该传感器中，甲醇及其后续代谢产物可诱导位于甲醇诱导型启动子控制下的荧光蛋白基因表达。通过荧光显微图像定量分析，作者筛选了甲醇诱导型启动子与宿主菌株，并优化预培养和检测条件，以提高甲醇检出限。流式细胞分选（FAC...