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Intravital FLIM-FRET imaging reveals dasatinib-induced spatial control of src in pancreatic cancer.

Cancer research 2013 Nobis M, McGhee EJ, Morton JP, Schwarz JP 等 17 人

癌症侵袭与转移发生在复杂三维环境中,并受周围宿主组织与血管的反馈调控。本研究建立了一种新型活体成像方法,用于揭示抗侵袭Src抑制剂dasatinib处理后Src活性的时空调控。作者采用基于荧光寿命成像显微镜–荧光共振能量转移(FLIM-FRET)的Src生物传感器,在p53突变转基因胰腺癌小鼠模型中实时监测药物靶向效力。与传统固定终...

Generation and application of signaling pathway reporter lines in zebrafish.

Molecular genetics and genomics : MGG 2013 Moro E, Vettori A, Porazzi P, Schiavone M 等 13 人

近年来,多种工具使生物学从简单模型层面转向更系统的科学。透明斑马鱼胚胎是重要活体模型,经报告蛋白编码基因的生殖系转化后,可在单细胞分辨率下追踪特定荧光细胞群。转化获得的转基因胚胎、幼鱼和成鱼可在特定时间和组织中开展延时分析、数字成像定量、流式细胞分选和下一代测序。这些多面遗传与细胞方法使研究者能够在亚细胞、细胞间、组织和整体动物水平...

Fluorescence resonance energy transfer imaging of cell signaling from in vitro to in vivo: basis of biosensor construction, live imaging, and image processing.

Development, growth & differentiation 2013 Aoki K, Kamioka Y, Matsuda M

荧光蛋白成像技术的进步揭示了发育生物学中的多种生物过程。特别是基于荧光共振能量转移(FRET)原理的遗传编码生物传感器,已被用于在活细胞中可视化胞内信号分子的空间与时间动态。然而,高灵敏度FRET生物传感器的开发及其在发育生物学中的应用仍具挑战,限制了其广泛使用。本综述首先概述FRET生物传感器成像的一般流程与实验技巧,随后介绍FR...

Vascular tone and Ca(2+) signaling in murine cremaster muscle arterioles in vivo.

Microcirculation (New York, N.Y. : 1994) 2013 Mauban JR, Zacharia J, Zhang J, Wier WG

本研究旨在确定麻醉小鼠骨骼肌小动脉基础血管张力的分子要求,并判断非同步钙波是否参与。作者将表达 exMLCK 或 smGCaMP2 遗传编码钙生物传感器的小鼠 cremaster 肌肉外翻,利用宽场、共聚焦和多光子显微镜观察平滑肌细胞钙信号与小动脉直径。结果显示,基础状态下小动脉张力约为 50%;局部阻断 Ang-II AT1 受体...