Visualization of Probiotic-Mediated Ca
益生菌如乳酸菌（LAB）和枯草芽孢杆菌纳豆变种可调节免疫反应。肠上皮细胞（IECs）是黏膜屏障的第一道防线，其活性影响肠道微环境与免疫，但益生菌如何直接作用于 IECs 的机制长期不明，主要受限于活体动物模型缺乏实时分析系统。作者此前构建了条件性钙离子生物传感器 Yellow Cameleon 3.60（YC3.60）转基因小鼠，并...
A simple approach for measuring FRET in fluorescent biosensors using two-photon microscopy.
遗传编码的荧光蛋白（FP）生物传感器可用于监测活细胞和组织中的细胞事件。由于多数探针最初针对单光子激发设计，其宽双光子激发（2PE）截面和尚未充分理解的漂白特性，使双光子激光扫描显微镜（TPLSM）应用困难。本文提出一种简化FRET型荧光生物传感器在TPLSM中使用的方案。首先利用活细胞中表达的FRET标准蛋白评估并优化TPLSM系...
Mitochondrial flashes: From indicator characterization to in vivo imaging.
线粒体是真核细胞能量产生与胞内信号转导的关键细胞器，其功能障碍常伴随并促进人类疾病。超氧化物是线粒体产生的主要活性氧（ROS），但其在体内的实时检测长期存在困难。本文描述了将循环置换黄色荧光蛋白（cpYFP）表征为线粒体超氧化物与 pH 动态生物传感器的方法。体外表征显示，cpYFP 对超氧化物相对于其他 ROS 具有较高选择性，同...
Live imaging of transforming growth factor-β activated kinase 1 activation in Lewis lung carcinoma 3LL cells implanted into syngeneic mice and treated with polyinosinic:polycytidylic acid.
转化生长因子β激活激酶1（TAK1）在细胞死亡、分化和炎症中发挥关键作用。本研究在皮下植入Lewis肺癌3LL细胞并注射多聚肌苷酸:多聚胞苷酸（PolyI:C）的同基因C57BL/6小鼠中，活体成像TAK1的激活。作者首先开发并表征了基于Förster共振能量转移（FRET）的TAK1活性生物传感器Eevee-TAK1。该传感器对放...
Non-invasive cell type selective in vivo monitoring of insulin resistance dynamics.
胰岛素抵抗是心血管疾病和2型糖尿病发生发展的重要因素，但如何在活体中动态监测胰岛素靶组织中特定细胞类型的胰岛素抵抗仍缺乏有效方法。本文报道一种非侵入、纵向、细胞类型特异性的活体监测技术，以朗格汉斯岛中的胰腺β细胞为例。作者将表达FoxO1-GFP生物传感器的胰腺胰岛移植至小鼠眼前房，利用角膜作为天然光学窗口，通过荧光显微镜在单细胞分...
Intravital imaging of Ca(2+) signals in lymphocytes of Ca(2+) biosensor transgenic mice: indication of autoimmune diseases before the pathological onset.
钙离子（Ca2+）信号是免疫受体（如B细胞抗原受体BCR）介导的典型现象，对其生物学活性至关重要。为同时分析免疫受体信号及其体内动态，作者基于Cre/loxP系统构建了稳定表达FRET型钙离子指示剂黄色变色龙3.60（YC3.60）的转基因小鼠（YC3.60flox）。成功获得在免疫细胞或神经细胞中特异性表达YC3.60的小鼠，以及...