Visualization of mechanical stress-mediated Ca
机械感受系统在维持肠道稳态中起作用，但相关机制细节稀缺。近期，我们构建了条件性表达 Ca2+ 生物传感器 yellow cameleon 3.60（YC3.60）的转基因小鼠模型，并建立了五维（5D；x、y、z、时间和 Ca2+）活体成像系统，用于研究淋巴组织和肠上皮细胞反应。为验证该肠道感知系统，我们在 Nestin-Cre/YC...
Live Visualization of ERK Activity in the Mouse Blastocyst Reveals Lineage-Specific Signaling Dynamics.
FGF/ERK信号对小鼠囊胚中各细胞谱系的模式形成与增殖至关重要，但ERK信号动态从未在活胚胎中被直接可视化。为探究不同信号水平是否与特定细胞命运和状态相关，作者构建了一株靶向小鼠品系，在所有细胞中表达ERK激酶转位报告蛋白（KTR），实现单细胞分辨率下ERK活性的活体定量。对囊胚进行三维时间序列成像发现，在滋养层明显分化为极性和壁...
High-performance FRET biosensors for single-cell and in vivo lead detection.
铅的各种形式长期隐蔽地危害人类健康，血铅水平（BLL）是诊断铅中毒程度的常规指标，但尚无明确安全范围。为开发可用于活体生物的检测工具，作者工程化了一种基因编码的荧光共振能量转移（FRET）型二价铅（Pb2+）生物传感器 Met-lead 1.44 M1。该传感器表观解离常数（Kd）为 25.97 nM，检出限（LOD）为 10 nM...
10.3390/nu12082293
肠道含有超过半数的免疫细胞和外周神经，并管理食物成分与宿主之间的有益相互作用。Paramylon 是裸藻（Euglena gracilis）中的 β-1,3-葡聚糖储存多糖，可通过影响细胞因子产生发挥免疫刺激活性。本研究利用活体和体外细胞类型特异性钙（Ca2+）成像，探讨调节食物成分与肠道相互作用的信号机制。我们成功在普遍表达黄色变...
Experimental pathology by intravital microscopy and genetically encoded fluorescent biosensors.
双光子激发显微镜的发明扩大了活体显微镜（IVM）在实验病理学中的应用潜力。近年来，基于荧光蛋白的遗传编码生物传感器为在活体动物中可视化细胞功能提供了理想工具。本文首先简要回顾双光子激发显微镜下的活体显微镜技术，以及基于 Förster 共振能量转移（FRET）原理的遗传编码生物传感器。随后，作者描述利用这些生物传感器开展活体成像如何...
Booster, a Red-Shifted Genetically Encoded Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Biosensor Compatible with Cyan Fluorescent Protein/Yellow Fluorescent Protein-Based FRET Biosensors and Blue Light-Responsive Optogenetic Tools.
基于 Förster 共振能量转移（FRET）的基因编码生物传感器已被用于可视化信号分子活性。目前大多数传感器由青色荧光蛋白和黄色荧光蛋白（CFP/YFP）组成，限制了在单个细胞内同时使用多种 FRET 传感器，且与蓝光驱动的光遗传工具不兼容。为克服这些问题，作者开发了具有红移激发和发射波长的 FRET 生物传感器。通过计算 För...
Engineered Sensor Zebrafish for Fast Detection and Real-Time Tracking of Apoptosis at Single-Cell Resolution in Live Animals.
凋亡在发育与疾病中发挥关键作用，但现有检测方法多为体外终点实验，难以在活体生理环境中实时监测。本研究构建了转基因传感器斑马鱼，使其皮肤特异性表达一种基于荧光共振能量转移（FRET）的 caspase-3 生物传感器。正常状态下，皮肤细胞发出绿色荧光；当凋亡过程中 caspase-3 被激活时，皮肤细胞转为发出蓝色荧光。通过时间序列 ...
Shedding new light on RhoA signalling as a drug target
小GTP酶RhoA是细胞与细胞外基质相互作用信号的关键调控因子，参与迁移、机械转导等过程，并在癌变中常发生紊乱。传统生化方法难以在天然组织环境中评估RhoA活性。作者开发了一种RhoA-FRET生物传感器小鼠，利用活体成像的高时空分辨能力监测RhoA活性。该小鼠采用改造型Raichu-RhoA报告蛋白，以EGFP和mRFP替代原CF...