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Using Chromatin-Nuclear Receptor Interactions to Quantitate Endocrine, Paracrine, and Autocrine Signaling.

Nuclear receptor signaling 2020 Taves MD, Ashwell JD

激素激活的核受体(NRs)调控多种细胞过程。经典激素递送模型是由内分泌器官分泌并经血液分布至靶细胞,但许多激素也可在靶组织内合成,形成旁分泌信号。载体蛋白结合、跨膜转运、代谢和受体可用性等因素会显著影响激素对靶细胞核受体的有效暴露,并因发育阶段、解剖部位和细胞类型而异。由于现有方法难以定量细胞内源暴露于核受体激素配体的水平,细胞特异...

Methods to Validate Binding and Kinetics of "Proximity-Inducing" Covalent Immune-Recruiting Molecules.

Current protocols in chemical biology 2020 Kapcan E, Lake B, Yang Z, Rullo AF

共价抑制剂和化学蛋白质组学探针的兴起,要求建立稳健的生物物理与分析方法,以表征其与靶标生物分子的复杂相互作用,并准确区分非共价结合与共价加合物形成。共价免疫招募分子(CIR)通过提高免疫细胞与肿瘤细胞接近度促进免疫识别。本文描述了生物层干涉(BLI)生物传感器、流式细胞术和溶液荧光检测方法,用于表征CIR与抗体的结合及CIR-抗体共...

10.3390/ijms21155482

International journal of molecular sciences 2020 Henke NA, Austermeier S, Grothaus IL, Götker S 等 7 人

谷氨酸棒杆菌类胡萝卜素合成受 MarR 型调控子 CrtR 控制,CrtR 抑制 crt 操纵子启动子 PcrtE 和自身基因 PcrtR 转录。GGPP 及其他异戊二烯焦磷酸在体外干扰 CrtR 与靶 DNA 结合,提示其为诱导物。为判断该功能在放线菌中是否保守,作者表征了五个 CrtR 同源物。EMSA 显示 C. callun...

Development of an epigenetic tetracycline sensor system based on DNA methylation.

PloS one 2020 Ullrich T, Weirich S, Jeltsch A

细菌活细胞传感器是检测环境毒素的有力工具。本研究建立并验证了基于DNA甲基化记忆功能的大肠杆菌阿拉伯糖传感器系统的流式细胞术读出方法。流式细胞术操作便捷,可实现多参数分析,并提供单细胞异质性信息,有利于此类传感器系统的进一步发展。鉴于抗生素污染与多重耐药病原体的重要性,作者设计了一种四环素传感器系统:通过用编码四环素阻遏蛋白的tet...

Plasmid expression level heterogeneity monitoring via heterologous eGFP production at the single-cell level in Cupriavidus necator.

Applied microbiology and biotechnology 2020

本研究评估了一种适用于动态发酵过程的质粒表达水平监测方法。该方法基于重组质粒编码的荧光生物传感器 eGFP,并结合单细胞分析,利用流式细胞术测量单细胞荧光强度。结果表明,基于单细胞分析的启动子评价比经典整体分析提供更有价值的信息。单细胞分析显示,胞内荧光强度随启动子强度增加而升高,直至达到阈值;超过阈值后,细胞通透性增加,荧光蛋白被...

A sperm-cell-based biosensor using a fluorescence probe for responsive signal readout toward bitter flavor detection.

Talanta 2020 Tian Y, Zhu P, Chen Y, Chen W 等 7 人

苦味检测因药物和食品安全问题受到广泛关注,现有苦味评价方法在性能和操作方面仍有提升空间。本研究提出一种新型精子细胞生物传感器(SCB),以活小鼠精细胞作为主要传感元件,采用 Fluo 4-AM 作为荧光换能器,并结合流式细胞术实现苦味化合物的快速定量检测。研究通过不同奎宁浓度优化了 SCB 的制备条件,并采用奎宁及另外两种苦味化合物...