In-Depth Characterization of Endo-Lysosomal Aβ in Intact Neurons.
淀粉样蛋白β（Aβ）肽在神经元内产生，部分释放至脑实质，部分保留在胞内。由于抗Aβ抗体同时捕获Aβ及其前体蛋白APP和C99，胞内Aβ检测仍具挑战。作者此前开发了C99 720-670 FRET生物传感器用于记录γ-分泌酶活性，并建立了多重免疫染色平台，可在亚细胞分辨率下选择性检测胞内Aβ。利用这些方法，作者发现C99主要在晚期内体...
Lysosome-Targeted Biosensor for the Super-Resolution Imaging of Lysosome-Mitochondrion Interaction.
溶酶体与线粒体之间的相互作用不仅包括线粒体自噬，还包括介导两种细胞器物质与信息交换的线粒体-溶酶体接触（MLC）。本研究设计并合成了一种具有荧光特性的溶酶体靶向生物传感器CNN，用于结构光照明显微镜（SIM）下的溶酶体成像，并进一步在病理条件下观察线粒体形态变化及MLC现象。首先采用CCK-8法检测CNN对H9C2心肌细胞的毒性，随...
Genetically Encoded, pH-Sensitive mTFP1 Biosensor for Probing Lysosomal pH.
溶酶体是细胞内大分子降解的关键场所，其腔内 pH 通常约为 4.5。为更准确地研究溶酶体 pH，作者设计了一种新型基因编码荧光蛋白 pH 生物传感器 FIRE-pHLy。该传感器通过溶酶体相关膜蛋白 1（LAMP1）靶向溶酶体膜，并利用单体青色荧光蛋白 1（mTFP1）作为腔侧 pH 敏感报告域，在 pH 3.5–6.0 范围内报告...
Mitochondrial clearance and maturation of autophagosomes are compromised in LRRK2 G2019S familial Parkinson's disease patient fibroblasts.
多项帕金森病（PD）全基因组关联研究（GWAS）在 4p16.3 位点发现显著信号，但因果变异尚未确定。对该区域深入分析发现 TMEM175 基因中的错义单核苷酸多态性 rs34311866（p.M393T）是区域内显著性最高的变异，比任何其他 SNP 高约 20 个数量级。由于 TMEM175 是溶酶体基因，已被证明影响 α-突触...
The ML1Nx2 Phosphatidylinositol 3,5-Bisphosphate Probe Shows Poor Selectivity in Cells.
磷脂酰肌醇(3,5)-二磷酸（PtdIns(3,5)P2）是真核细胞中含量较少的磷脂，在调控内吞膜运输中发挥基本作用。尽管其细胞功能和机体生理意义明确，但机制细节尚未完全阐明，部分原因是缺乏能在细胞中特异性探测 PtdIns(3,5)P2 的实验工具，以明确其动态和作用位点。本研究评估了近期报道的 PtdIns(3,5)P2 生物传...