本文基于新型滚环扩增（RCA）构建了一种灵敏的比色生物传感器，用于铅离子（Pb2+）的定量检测。检测系统中，GR5 DNAzyme 修饰在免疫磁珠表面，Pb2+ 被识别元件捕获后诱导 GR5 DNAzyme 解离，并释放 DNA walker 产生的 cDNA。随后加入模板 DNA、T4 DNA 连接酶和 phi29 DNA 聚合酶...
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus, S. aureus）是常见食源性致病菌，可引起发热、呕吐等肠道症状，严重危害人类健康与社会安全，因此需要可靠且灵敏的检测技术。本文提出一种基于万古霉素功能化磁珠（Van-MNPs）的夹心检测策略，用于 S. aureus 检测。Van-MNPs 利用万古霉素与革兰氏阳性菌...
肿瘤来源外泌体作为液体活检标志物在肿瘤精准诊断中具有重要前景，但兼具高灵敏度与便捷性的可视化外泌体检测方法仍是临床应用的挑战。本文构建了一种基于滚环扩增（RCA）辅助平台的双信号放大比色生物传感器，可视觉检测白血病来源外泌体。为减少血清成分干扰，先将触发探针-适配体复合物修饰在磁珠（MBs）上用于识别外泌体；外泌体存在时，适配体与外...
本文提出一种新型视觉检测模式，用于提高赭曲霉毒素A（OTA）的检测灵敏度。该模式基于适配体识别和滚环扩增（RCA）产物自组装DNA水凝胶的信号放大。通过调整锁式探针序列，使DNA水凝胶与金纳米颗粒（AuNPs）之间形成更强结合力，从而将AuNPs直接组装到DNA水凝胶内部，避免了对AuNPs进行DNA序列修饰。在OTA存在时形成DN...
比色法因操作简便、可肉眼观察颜色变化而受到关注，但高灵敏度比色传感方法仍具挑战。本文基于CRISPR-Cas12a、滚环扩增（RCA）和金纳米颗粒（AuNPs）的催化活性，构建了一种用于高灵敏检测黄曲霉毒素M1（AFM1）的比色适配体传感器。当样品中存在AFM1时，AFM1适配体与AFM1结合，使CRISPR-Cas12a失活，Au...
成簇规律间隔短回文重复序列（CRISPR）及CRISPR相关蛋白（Cas）系统因其高保真性、可编程性和高效信号放大能力，为下一代生物传感器提供了新途径。开发基于CRISPR/Cas的可视化检测系统有助于生物标志物的即时诊断。现有基于CRISPR/Cas9的可视化检测方法受Cas9固有特性限制。本文探索了Cas13a对含核糖核苷酸的D...
本文设计了一种通用比色传感平台，用于癌症来源外泌体（HepG2细胞来源）的灵敏、特异、快速筛查。该平台引入辣根过氧化物酶封装DNA纳米花（HRP-DF）作为生物识别元件和信号产生标签。在滚环扩增（RCA）过程中，HRP同时与不断增长的超长链DNA及焦磷酸镁（Mg2PPi）晶体结合，从而将HRP直接固定于DNA纳米花中。以编码CD63...
本文提出一种新型基于DNA的生物传感器，用于快速灵敏检测尿液中赭曲霉毒素A（OTA）。该传感器以负载OTA捕获适配体的顺磁性微珠为基础，捕获适配体固定于磁性微珠表面，可特异性富集液相样品中的OTA。与捕获适配体相连的夹心式检测复合物在OTA存在时触发等温滚环扩增（RCA）反应。RCA产生具有过氧化物酶活性的自催化DNAzyme单元，...
DNA检测中PCR高特异但依赖热循环仪等实验室设备，限制现场应用。等温扩增技术如锁探针（PLP）介导的滚环扩增（RCA）具有优势，但通常仍需仪器读取扩增产物。为克服该限制并保留PLP-RCA优势，作者开发了一种基于pH变化的比色检测方法。该方法利用DNA聚合酶在等温扩增过程中释放质子导致反应体系pH下降，使pH指示剂酚红发生颜色变化...
本研究建立了一种基于双功能适配体（Dual-Apt）和切割辅助滚环扩增（CA-RCA）的副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）快速可视化生物传感器。锚定适配体（A-Apt）特异性结合副溶血性弧菌表面，在链霉亲和素磁珠（SMB）辅助下从食品基质中分离并富集目标菌；检测适配体（D-Apt）结合菌体表面不同位点，作...
本文报道了一种可执行目标诱导滚环扩增（RCA）的纸基诊断器件，用于在无需复杂仪器的条件下产生大量可肉眼或图像分析可视化的DNA扩增产物。研究发现，与溶液相比，纸基表面上的RCA效率更高，作者将其归因于固定化DNA在纸面微区中形成的显著更高局部浓度，从而提高引物-模板双链的热稳定性并加速酶促反应。进一步，作者通过蜡印/喷墨印刷技术将环...
由于疾病标志物在体液或组织中含量极低，超灵敏蛋白检测方法对基础研究和实际应用至关重要。本文报道了一种基于金纳米颗粒（AuNPs）和滚环扩增（RCA）的灵敏比色生物传感器，用于蛋白检测。当目标蛋白存在时，生物素化引物/环状模板通过生物素-链霉亲和素作用结合到链霉亲和素标记的夹心酶联免疫复合物上，随后生物素化引物在等温条件下延伸，生成单...
本文报道了一种用于监测滚环扩增（RCA）的比色方法，以检测 H5N1 流感病毒。首先，H5N1 目标序列与锁式探针（PLP）杂交，随后在 T4 DNA 连接酶作用下使 PLP 环化。环化探针作为模板，在大片段 Bst DNA 聚合酶催化下进行超支滚环扩增（HRCA）。反应过程中 DNA 聚合产生焦磷酸（PPi），PPi 螯合缓冲液中...