Microbiology spectrum
2023
Valenzuela-García LI, Alarcón-Herrera MT, Ayala-García VM, Barraza-Salas M 等 7 人
本研究在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中构建了一种基于绿色荧光蛋白(GFP)的全细胞生物传感器(WCB-GFP),用于监测砷(As)。作者将 gfpmut3a 基因置于砷操纵子启动子/操纵区(Pars)控制下,构建到质粒 pAD123 中,并转化至 B. subtilis 168,获得菌株 BsWCB-GFP。该...
Analytical chemistry
2022
Chen SY, Zhang Y, Li R, Wang B 等 5 人
用于砷污染检测的全细胞生物传感器通常基于天然细菌感知系统构建,但难以精确调控遗传响应。启动子设计是解决该问题的关键途径之一。本研究以大肠杆菌MG1655中砷响应性的ArsR-Pars调控系统作为识别元件,并连接gfp或lacZ报告基因,构建用于表征重构启动子的遗传电路。首先分析ArsR结合位点(ABS)和RNA聚合酶结合位点库,挖掘...
Environmental science and ecotechnology
2021
Li P, Wang Y, Yuan X, Liu X 等 9 人
本研究通过将从脱硫弧菌(Geobacter sulfurreducens)中获得的 ArsR1(GSU2952)调控回路置于绿色荧光蛋白(GFP)报告基因上游,构建了一种用于特异性检测生物可利用砷的大肠杆菌全细胞生物传感器。该大肠杆菌细胞仅在亚砷酸盐存在时发出绿色荧光,且在 M9 补充培养基中培养时比在 LB 培养基中对亚砷酸盐更敏...
Methods in enzymology
2017
Wynn D, Deo S, Daunert S
细菌全细胞生物传感器通过遗传工程实现了对多种危险化学物质的选择性、可靠检测。与质谱、原子吸收等传统仪器相比,全细胞传感器成本低、无需复杂设备,并能反映分析物的生物可利用性与毒性。然而,活细胞传感器通常保质期有限,需要冷藏、冷冻或特定储存条件,在试剂、仪器和专业人员匮乏的现场环境中应用受限。为克服上述问题,可将生物传感基因构建体转入可...
The Review of scientific instruments
2014
Truffer F, Buffi N, Merulla D, Beggah S 等 8 人
本文报道一种用于水样中砷检测的紧凑便携式生物传感器。该装置采用工程化大肠杆菌生物报告细胞作为识别元件,菌株 E. coli 1598 携带 pPROBE-ArsR-ABS 质粒,可在三价砷和五价砷诱导下表达绿色荧光蛋白(GFP),且 GFP 荧光强度在 0–100 μg/L 范围内与砷浓度呈线性关系。传感器核心为聚二甲基硅氧烷(PD...
Bioengineered bugs
2011
Buffi N, Merulla D, Beutier J, Barbaud F 等 8 人
细菌生物报告器与微流控系统结合有望实现化学或毒性目标的现场检测。作者将工程化大肠杆菌细胞封装于琼脂糖微珠并集成到 PDMS 微流控芯片中,用于检测饮用水中的无机砷。该菌株在接触亚砷酸盐或砷酸盐后,通过 ArsR 调控系统诱导表达增强型绿色荧光蛋白 eGFP。约 1000 个含菌琼脂糖微珠被捕获在芯片 500×500 μm² 滤笼中,...
Analytical and bioanalytical chemistry
2011
de Mora K, Joshi N, Balint BL, Ward FB 等 6 人
全球估计超过1亿人受砷污染地下水影响,孟加拉国和西孟加拉国是最严重地区之一。现场砷检测需要一种简单、廉价、准确且可抛弃的设备。作者此前报道了一种以pH变化为输出的新型砷生物传感器,可通过pH指示剂的颜色变化进行视觉检测。本文提出改进的试验配方,使样品在静态过夜孵育条件下即可敏感、准确地检测低于10 ppb的砷酸盐。此外,作者描述了一...