磷酸酶和张力蛋白同源物诱导激酶1（PINK1）是一种线粒体丝氨酸/苏氨酸激酶，参与线粒体自噬、细胞死亡和细胞生物能量调节。健康线粒体中 PINK1 被切割降解，线粒体损伤后全长 PINK1 稳定、二聚并自磷酸化激活，进而磷酸化 Parkin 和泛素，标记受损线粒体。现有 PINK1 研究多依赖整体检测，只能提供活性快照，难以反映单细...
背景：阿比特龙（abiraterone）和MDV3100是前列腺癌的有效抗癌药物，但其下游作用机制尚不明确。方法：将双荧光生物传感器质粒转染LNCaP细胞以测量线粒体自噬；提取LNCaP细胞DNA并进行定量实时PCR检测线粒体DNA拷贝数；采用JC-1染色检测线粒体膜电位；电子显微镜分析线粒体形态；Western blot检测线粒体...
受损线粒体参与神经病理过程，使线粒体自噬受到关注。本研究通过药物抑制原代小鼠小脑颗粒神经元（CGCs）线粒体呼吸链，探讨神经元线粒体自噬的触发因素。分别用鱼藤酮（Rot）、3-硝基丙酸（3-NP）、抗霉素A（AA）和氰化钾（KCN）抑制复合物I、II、III和IV，并依据细胞活力、突起损伤、质膜通透性和氧化磷酸化确定产生缓慢细胞死亡...
线粒体是真核细胞主要的能量产生中心，并参与脂质代谢、钙缓冲和凋亡等关键过程，其功能障碍会破坏细胞稳态。线粒体自噬通过选择性隔离受损或功能异常的线粒体，将其转运至溶酶体降解，从而维持细胞功能并影响寿命。本文以秀丽隐杆线虫为模型，介绍在活体中定量监测线粒体自噬事件的实验方法。作者利用体壁肌细胞中表达的荧光报告系统，通过共聚焦或荧光显微镜...
线粒体功能障碍与多种人类疾病及正常衰老相关，其稳态依赖线粒体自噬（mitophagy）介导的受损线粒体向溶酶体转运与降解。线粒体自噬依赖巨自噬（macroautophagy），但本身是选择性过程，可在特定条件下与巨自噬解耦，因此需同时并分别评估两者。作者开发了一种基于流式细胞术（FCM）的高通量定量方法，利用单一荧光蛋白生物传感器 ...
自噬在多种条件下参与细胞组分周转，既是稳态维持机制，也是质量控制机制，可选择性降解包括细胞器在内的细胞物质。若受损或多余线粒体未被清除，可能威胁细胞稳态与存活。在酿酒酵母中，营养缺乏（如氮饥饿）或损伤可诱导线粒体选择性自噬，即线粒体自噬。本文描述一种简单荧光显微镜方法，用于评估酵母细胞中的自噬，并重点展示监测线粒体自噬。该方法使用双...