Breast cancer research : BCR
2024
Liao CC, Long Y, Tsai ML, Lin CY 等 6 人
自噬是癌症进展和耐药中的关键过程,但现有自噬检测方法常具侵入性且耗时,限制其在临床前药物研究中的应用。本研究开发了一种非侵入性自噬检测系统(NIADS-autophagy,又称G-cleave LC3B生物传感器),将split-luciferase生物传感器与LC3B切割序列整合,通过蛋白酶介导的降解途径快速识别Earle’s B...
STAR protocols
2024
Gökerküçük EB, Tramier M, Bertolin G
本文提出一种用于全面定量自噬起始的实验方案,基于 LC3B Förster 共振能量转移(FRET)生物传感器的读出。该传感器在 proLC3B 的 N 端和 C 端分别融合供体荧光蛋白 Aquamarine 和受体荧光蛋白 tdLanYFP;当 ATG4B 无活性时,proLC3B 保持完整,供体与受体距离较近而发生 FRET;A...
Molecular metabolism
2024
Nguyen K, Tang J, Cho S, Ying F 等 8 人
本研究旨在阐明介导胰岛素敏感性的新机制,以验证相应治疗靶点。作者首先建立骨骼肌细胞铁过载模型,发现铁处理后出现内质网应激和胰岛素抵抗。通过构建表达 Akt 生物传感器的细胞(基于核内 FoxO 定位)以及胰岛素信号蛋白 Western blot,评估胰岛素敏感性。使用 salubrinal 提高 eIF2α 磷酸化并促进未折叠蛋白反...