内质网（ER）应激参与癌症、2型糖尿病、肾病、动脉粥样硬化及神经退行性疾病（尤其帕金森病，PD）的发病机制。目前 PD 尚无有效治疗，深入理解 ER 应激条件下未折叠蛋白反应（UPR）从适应性反应向凋亡转变的机制，有助于寻找治疗策略。基于荧光蛋白的遗传编码生物传感器可用于活细胞中分子事件的实时可视化。本研究将患者特异性 iPSC 技...
本研究旨在阐明介导胰岛素敏感性的新机制，以验证相应治疗靶点。作者首先建立骨骼肌细胞铁过载模型，发现铁处理后出现内质网应激和胰岛素抵抗。通过构建表达 Akt 生物传感器的细胞（基于核内 FoxO 定位）以及胰岛素信号蛋白 Western blot，评估胰岛素敏感性。使用 salubrinal 提高 eIF2α 磷酸化并促进未折叠蛋白反...
测量植物未折叠蛋白反应（UPR）激活状态对理解胁迫适应很重要。作者开发了一种活细胞 UPR 生物传感器-报告系统：将 bZIP60 位点的小细胞质剪接内含子整合到 GFP 基因 5′ 端，构建 35S::bZIP60 intron:GFP 载体。该载体在拟南芥原生质体中瞬时表达时，非 UPR 条件下内含子阻止 GFP mRNA 翻译...
本研究针对毕赤酵母（Pichia pastoris）中广泛使用的酿酒酵母 α-交配因子前前导肽（MFα）分泌信号，系统评估了包括 V50A 在内的 20 个单氨基酸替换对重组蛋白分泌的影响。结果显示，V50A、V38A、G40D、L42S、L63S、L64S、F65S 和 I66T 等单突变可显著提高抗溶菌酶单链抗体（scFv）的分...
未折叠蛋白反应（UPR）是真核细胞应对内质网（ER）应激的高度保守反应，通常由未折叠蛋白积累触发。除与癌症等疾病相关外，UPR 诱导对真核细胞工厂的重组蛋白生产有显著影响，包括工业酵母酿酒酵母。能在单细胞水平准确检测和测量 ER 应激，有助于快速优化蛋白生产条件并实现高通量菌株筛选。现有监测酿酒酵母 UPR 的方法常与培养阶段在时间...
酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）具有乙醇生产的工业优势，并可通过异源表达纤维素酶用于木质纤维素生物质的整合生物加工（CBP）。然而，该酵母分泌的纤维素酶滴度较低，原因之一是异源蛋白诱导未折叠蛋白反应（UPR）。现有 UPR 检测方法主要基于 RNA，结果不一致且操作繁琐。本研究开发了基于载体的 UPR 生...
氨基胍类化合物罗苯啶（robenidine）长期用作鸡和兔球虫病的抗球虫药。其结构与正在作为神经退行性疾病细胞保护剂进行临床试验的瓜苯（guanabenz）类似物相似。本文显示，罗苯啶和瓜苯在相似程度上保护细胞免受tunicamycin诱导的内质网应激和未折叠蛋白反应（UPR）损伤，并降低肿瘤坏死因子α（TNFα）诱导的NF-κB激...
病理性内质网（ER）应激与活性氧化剂积累密切相关，二者可互为上下游，形成恶性循环，导致多种疾病中的组织萎缩。因此，实时、时间分辨地监测应激诱导的 ER 氧化还原（redox）状态变化十分重要。遗传编码荧光探针的出现使区室特异性氧化还原检测成为可能，这些探针可通过特定氨基酸扩展靶向不同亚细胞位置，包括氧化还原敏感绿色荧光蛋白（roGF...