Biosensors
2023
Martínez-Pérez-Cejuela H, Calabretta MM, Bocci V, D'Elia M 等 5 人
腺苷三磷酸(ATP)检测长期用于评估不同场所和工作环境中的微生物污染。现有商业化试剂盒多依赖荧光素酶–荧光素体系,但需在+4 ℃或−20 ℃冷链条件下储存和运输,限制了其在偏远地区或低资源场景中的应用。为此,作者开发了一种用于ATP监测的生物发光纸基生物传感器,将新型荧光素酶突变体BgLuc与金属–有机框架沸石咪唑酯骨架材料-8(Z...
Methods in cell biology
2020
Morciano G, Imamura H, Patergnani S, Pedriali G 等 6 人
ATP是细胞能量代谢的核心代谢物,也是细胞内信号分子,其浓度变化与细胞功能、活力和命运密切相关。本文介绍两种基于遗传编码生物传感器的活细胞ATP检测方法:萤火虫荧光素酶生物发光法和ATeam FRET荧光生物传感器。前者利用线粒体靶向萤火虫荧光素酶(mtLuc)在细胞内催化荧光素(luciferin)、ATP和O2反应,生成激发态o...
Biosensors & bioelectronics
2016
Wimmer T, Lorenz B, Stieger K
眼部新生血管疾病如年龄相关性黄斑变性、糖尿病视网膜病变、早产儿视网膜病变和视网膜静脉阻塞,均由缺氧诱导的血管内皮生长因子(VEGF)上调引起。由于眼内采样具有侵入性,目前眼内 VEGF 浓度与病理程度及抗 VEGF 疗效之间的关联仍有限,因此需要微创、可重复的 VEGF 定量方法。本文报道了三种基于增强生物发光共振能量转移(eBRE...
Analytical biochemistry
2015
Branchini BR, Southworth TL, Fontaine DM, Kohrt D 等 9 人
萤火虫荧光素酶通过高度特异的ATP依赖过程发射可见光,已广泛用于基因报告、全细胞生物传感器测量和活体成像。作者此前报道了一种嵌合酶,其N端来自Photinus pyralis荧光素酶,C端来自Luciola italica荧光素酶,具有约2倍增强活性和1.4倍更高生物发光量子产率。随后作者鉴定出5个基于L. italica的氨基酸改...
Analytical biochemistry
2010
北美萤火虫 Photinus pyralis 荧光素酶(Luc)发射黄绿光(557 nm),已广泛用于基因报告检测、全细胞生物传感器测量和活体成像。具有红移生物发光且比活性较高的荧光素酶变体可与绿色发光酶配对用于双颜色报告检测,也可单独用于活体成像。本研究以先前报道的红色发光热稳定突变体为模板,通过定点突变技术构建两种发射峰更红、同...
Toxicological sciences : an official journal of the Society of Toxicology
2009
Lagido C, McLaggan D, Flett A, Pettitt J 等 5 人
亚致死代谢效应是重要的毒理学终点。本研究采用表达萤火虫荧光素酶的转基因秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)生物发光作为快速、定量的代谢终点,评估氧化应激剂和环境污染物镉(以氯化镉形式提供)在亚致死慢性暴露(19 h)下的效应。在0–30 μM Cd测试范围内,线虫生物发光呈浓度依赖性下降,其灵敏度与分别经67...