蛋白质的翻译后修饰（PTMs）是细胞信号网络中几乎所有动态过程的关键机制。基于荧光蛋白（FPs）的遗传编码报告分子是时空可视化细胞参数的有力工具。因此，常用模块化生物传感器设计已被改造，用于生成多种蛋白基指示器，以监测活细胞中不同 PTM 或相应酶活性，为单个 PTM 的动力学与调控功能提供新的生物学认识。本综述描述聚焦 PTM 的...
荧光蛋白是研究生物分子与细胞过程的重要工具，基于荧光蛋白的生物传感器越来越多地用于活细胞中生物分子与事件的监测。本综述聚焦一类特殊荧光蛋白生物传感器：通过遗传编码将非天然氨基酸（UAA*）作为传感元件引入荧光蛋白。当UAA*与目标分析物直接相互作用时，其化学和/或物理性质发生改变，从而触发生物传感器荧光性质变化并产生读出信号。与仅在...
细胞依赖复杂且相互连接的信号通路网络来感知并解释胞外环境变化。基因编码荧光蛋白（FP）生物传感器的发展使研究者能够在活细胞中直接观察和表征这些胞内信号通路的时空动态。然而，当单独监测单个信号事件时，往往难以获得交叉通路之间精确的时序和空间关系。随着生物传感器技术不断进步，同时成像多个 FP 生物传感器正变得越来越可行，从而允许在同一...
基因编码荧光蛋白（FP）生物传感器是无创追踪活细胞分子事件的有力工具。尽管已有多种FP生物传感器，但在单个活细胞中同时成像多个生物传感器（多参数成像）仍是挑战，尚未常规用于解析复杂分子事件网络。本研究建立了一种新型FP生物传感器组合，用于双参数比率荧光成像，由新的荧光共振能量转移（FRET）对mVenus（黄色FP）/mKO（橙色F...
本文从理论和实验上证明，可通过直接且系统地饱和受体分子激发态来定量 Förster 共振能量转移（FRET），并将该受体耗竭方法称为 satFRET。该方法可逆，适合时间分辨测量。作者基于供体-受体分子状态微分方程组的稳态解建立模型，并纳入测量过程中受体光漂白的影响。实验采用不同化学计量比的 Alexa 546-Alexa 633 ...