Nitric Oxide Sensing by a Blue Fluorescent Protein.
半胱氨酸残基的 S-亚硝基化是多种蛋白质动态翻译后调控和氧化还原调节的重要机制。许多荧光蛋白(FP)含有半胱氨酸,GFP 衍生荧光蛋白中两个高度保守的 Cys 残基为发色团自催化形成提供有利微环境。尽管荧光蛋白 25 年来一直是细胞生物学工具,但一氧化氮(NO)对其荧光性质的影响此前未被研究。本文考察蓝色发射荧光蛋白 mTagBFP...
半胱氨酸残基的 S-亚硝基化是多种蛋白质动态翻译后调控和氧化还原调节的重要机制。许多荧光蛋白(FP)含有半胱氨酸,GFP 衍生荧光蛋白中两个高度保守的 Cys 残基为发色团自催化形成提供有利微环境。尽管荧光蛋白 25 年来一直是细胞生物学工具,但一氧化氮(NO)对其荧光性质的影响此前未被研究。本文考察蓝色发射荧光蛋白 mTagBFP...
自首个基于荧光共振能量转移(FRET)的钙指示剂Cameleon问世以来,多种遗传编码生物传感器(GEB)被用于在活细胞中时空分辨地监测离子浓度、细胞状态和酶活性等生理参数。FRET依赖供体与受体荧光蛋白间光谱重叠和非辐射能量转移,当传感域与目标分子相互作用引起构象变化时,供体-受体距离改变,从而改变FRET效率。现有GEB优化常需...
现代生物学日益依赖光学技术,包括细胞过程的可视化与纵向监测。当前主要限制是缺乏能在体内自然环境中追踪分子和细胞的动物模型。由于组织完整性以及转基因表达在整个生命周期中的高稳定性,编码荧光蛋白和生物传感器的转基因小鼠成为正常与病理状态下体内研究的独特工具。本文综述将探针表达靶向特定组织、细胞亚型或细胞区室的策略,并描述表达荧光蛋白的转...
在信号转导蛋白中,内在无序区常作为调控元件,对环境变化、配体结合和翻译后修饰敏感。无序区所采样的构象空间可受环境刺激影响,并通过效应结构域触发下游过程。这类调控元件的无序性使其能够整合信号并产生分级响应,但也阻碍了基于固定三维结构的传统药物筛选方法。作者设计了一种可遗传编码的生物传感器,用于检测 c-Src 激酶 N 端调控元件(S...