Development of a Novel ATP Bioluminescence Assay Based on Engineered Probiotic
三磷酸腺苷(ATP)定量分析在食品、生物技术和诊断领域应用广泛,且炎症性肠病(IBD)等疾病的发生发展与高 ATP 水平密切相关。目前,基于 D-荧光素/荧光素酶体系的生物发光法因灵敏度和特异性高而成为 ATP 检测的常用方法,但传统方法依赖重组大肠杆菌表达并纯化萤火虫荧光素酶(FLuc),成本较高。本研究旨在开发无需提取和纯化 F...
三磷酸腺苷(ATP)定量分析在食品、生物技术和诊断领域应用广泛,且炎症性肠病(IBD)等疾病的发生发展与高 ATP 水平密切相关。目前,基于 D-荧光素/荧光素酶体系的生物发光法因灵敏度和特异性高而成为 ATP 检测的常用方法,但传统方法依赖重组大肠杆菌表达并纯化萤火虫荧光素酶(FLuc),成本较高。本研究旨在开发无需提取和纯化 F...
本文报道了一种无标记、基于生物发光的纳米生物传感器,用于检测腺苷三磷酸(ATP)。由于ATP浓度可反映活细胞数量,开发低成本、易操作的ATP传感器具有重要意义。作者研究了柠檬酸包覆的金纳米粒子(AuNPs)、银纳米粒子(AgNPs)、金银核壳纳米粒子、金纳米棒(GNRs)以及牛血清白蛋白-金纳米簇(BSA-AuNCs)与萤火虫荧光素...
本文为原论文勘误。原论文报道了一种新型萤火虫荧光素酶生物传感器,用于增强检测结核分枝杆菌ESAT-6家族蛋白诱导的细胞凋亡。本文未提供新的实验方法、结果或讨论,仅说明投稿时流式细胞术图2A中“TNF-α(40 ng/mL)+CHX(5 μg/mL)”组图像被误选。作者已将图2A替换为原始数据源中的正确图像,并声明该更正不会影响原论文...
萤火虫荧光素酶催化的生物发光反应是测定三磷酸腺苷(ATP)的经典分析体系,但游离酶在溶液中不稳定且难以重复使用,将其固定于固体基底可部分解决该问题。本文以表面富含羟基的聚乙烯醇-乙烯共聚物(PVA-co-PE)纳米纤维膜为基底,先用三聚氯氰(cyanuric chloride)引入三嗪基团进行表面活化,再分别与1,3-丙二胺和生物素...
本文报道了一种基于 DmpR 蛋白效应物结合位点突变的全细胞生物发光细菌传感器,用于快速灵敏检测环境中生物可利用酚。作者以 Pseudomonas sp. CF600 的 DmpR 基因及其 Pr/Po 启动子/操纵子为识别调控元件,以萤火虫 luc 基因为报告基因,构建 pRLuc 系列质粒。通过 LIGSITE 预测 DmpR ...
新型基因编码生物传感器利用改造的萤火虫荧光素酶,有望在活细胞中显著提升信噪比与响应动态范围。该类传感器在关闭状态下通过铰链结构阻碍荧光素酶与底物荧光素结合,仅在蛋白活性状态触发构象闭合时催化荧光素氧化并发光,从而获得接近零背景与数倍至二十倍以上的信号变化。由于响应特性优异,其特别适用于大孔板格式的高通量筛选,并可通过替换蛋白酶识别序...