An intein-based biosensor to measure protein stability in vivo.
体内测量蛋白稳定性的生物传感器对多种应用具有重要价值。此前工作表明，将目标蛋白（POI）插入报告蛋白的三元设计可将 POI 稳定性与报告活性相联系。内源蛋白（intein）可在其他蛋白内部翻译，并通过自介导蛋白剪接反应被切除。本研究开发了一种新型折叠生物传感器：将 POI 插入 intein，再将该 intein 置于抗生素抗性标记...
Improved dual luciferase reporter (DLR) assay to determine the protein stability.
本研究构建了一个同时表达萤火虫荧光素酶（FF）和海肾荧光素酶（REN）的二元载体，用于检测不同刺激下蛋白稳定性，并验证了载体功能。StrigoQuant 类似报告系统在同一转录本中表达 FF 和 REN，是检测不同基因型蛋白丰度的敏感工具。然而，作者发现空 StrigoQuant 载体在不同基因型中的相对 FF/REN 比值存在显著...
New insight in protein-ligand interactions. 2. Stability and properties of two mutant forms of the D-galactose/D-glucose-binding protein from E. coli.
大肠杆菌 D-半乳糖/D-葡萄糖结合蛋白（GGBP）是 32 kDa 的典型双域配体结合蛋白，其葡萄糖解离常数处于微摩尔级，因此不适合用于糖尿病患者血液葡萄糖的连续监测。本研究设计、表达并表征了两种 GGBP 突变体，其活性中心分别发生 W183A 或 F16A 氨基酸替换。两种突变体均保留与野生型相似的球状结构，但对葡萄糖的亲和力...