Features of Chaperone Induction by 9-Aminoacridine and Acridine Orange.
9-氨基吖啶（9-AA）和吖啶橙（AO）是可通过嵌入 DNA 碱基间引起移码突变的荧光染料，也可影响蛋白质等细胞组分。本研究采用基于大肠杆菌的全细胞 lux 生物传感器、RT-qPCR 和 nanoDSF，检测 9-AA 与 AO 诱导细菌热休克的能力。lux 生物传感器将发光菌 luxCDABE 基因分别融合于热休克特异性诱导启动...
An intein-based biosensor to measure protein stability in vivo.
体内测量蛋白稳定性的生物传感器对多种应用具有重要价值。此前工作表明，将目标蛋白（POI）插入报告蛋白的三元设计可将 POI 稳定性与报告活性相联系。内源蛋白（intein）可在其他蛋白内部翻译，并通过自介导蛋白剪接反应被切除。本研究开发了一种新型折叠生物传感器：将 POI 插入 intein，再将该 intein 置于抗生素抗性标记...
DJ-1 Molecular Chaperone Activity Depresses Tau Aggregation Propensity through Interaction with Monomers.
携带tau聚集体的病变是tau病性神经退行性疾病（包括阿尔茨海默病）的病理标志和潜在介导因素。分子伴侣DJ-1在这些疾病中与tau病理共定位，但二者功能联系不明。本研究在体外以分离蛋白考察tau/DJ-1相互作用的后果。在促进聚集条件下，将DJ-1加入全长2N4R tau后，以浓度依赖方式抑制纤维形成的速率和程度。抑制活性为低亲和力...
Chaperoning activity of the cyclophilin family prevents tau aggregation.
tau 病如阿尔茨海默病以微管相关蛋白 tau 错误折叠和进行性积累为特征。分子伴侣负责维持蛋白稳态，随年龄失衡可促进神经退行性疾病进展。环孢素蛋白是具有肽基脯氨酰异构酶活性的研究不足但前景良好的伴侣蛋白，可能在调控 tau 聚集方面发挥保护作用。采用 Thioflavin T（ThT）荧光法监测体外 tau 聚集，发现 PPIA ...
A biosensor of protein foldedness identifies increased "holdase" activity of chaperones in the nucleus following increased cytosolic protein aggregation.
分子伴侣等质量控制机制可防止蛋白质错误折叠与聚集，但其在不同细胞区室中如何维持蛋白组折叠状态仍不清楚。本研究采用基于荧光共振能量转移（FRET）的策略，利用由原核核糖核酸酶 barnase 构建的“诱饵”生物传感器，检测人胚胎肾细胞 HEK293T 细胞核与细胞质中质量控制机制对错误折叠和聚集的保护能力。结果显示，barnase 生...
Chaperone OsmY facilitates the biogenesis of a major family of autotransporters.
OsmY 是一种广泛保守但功能尚不清楚的 20 kDa 周质蛋白。我们此前利用折叠生物传感器获得证据，表明 OsmY 具有分子伴侣活性。为发现 OsmY 的天然底物，我们筛选了在 osmY 缺失株中因不稳定而稳态水平降低的蛋白。外膜蛋白抗原 43（Ag43）丰度显著下降，其 β-桶结构域在 osmY 缺失株外膜中不可检测。Ag43 ...
A biosensor-based framework to measure latent proteostasis capacity.
维持蛋白质折叠稳态（proteostasis）的质量控制（QC）蛋白池具有动态性，但在人类疾病中可能耗竭。定量界定该 QC 池的深度是一个挑战。作者开发了一种新的生物传感器，并结合流式细胞术方法和数学建模，测量 QC 系统作为 holdase 结合未折叠底物以及抑制生物传感器聚集的能力。该生物传感器由一系列具有不同折叠稳定性的 ba...
The molecular chaperone apolipoprotein J/clusterin as a sensor of oxidative stress: implications in therapeutic approaches - a mini-review.
生物体持续暴露于生理与环境应激，需要高效监控基因组与蛋白质组质量以维持稳态。分子伴侣是细胞内外蛋白质组监控系统的核心，既参与蛋白质组维持，也参与清除。载脂蛋白J/聚簇蛋白（CLU）基因编码的常规产物为广泛表达的异源二聚体分泌糖蛋白（sCLU），具有类似小热休克蛋白的应激诱导伴侣活性，参与多种生理过程，并与衰老及肿瘤发生、神经退行、心...
Binding of the molecular chaperone αB-crystallin to Aβ amyloid fibrils inhibits fibril elongation.
αB-crystallin是一种小热休克蛋白，在多种应激刺激下上调，并与阿尔茨海默病特征性细胞外斑块中的Aβ淀粉样纤维共定位。本研究在体外考察该典型小热休克蛋白能否与Aβ纤维相互作用。结果表明，αB-crystallin以微摩尔级亲和力结合野生型Aβ42纤维，也结合Aβ42 E22G Arctic突变纤维；免疫电镜证实结合发生在纤维...
Studying the effects of chaperones on amyloid fibril formation.
细胞和动物模型研究表明，分子伴侣在体内控制蛋白错误折叠和淀粉样形成过程中发挥重要作用。此外，伴侣蛋白还参与酵母中朊病毒表型的出现、传播和清除。近年来，为阐明其机制，研究者详细考察了伴侣蛋白对淀粉样形成的影响。体外直接研究伴侣蛋白对淀粉样纤维形成的影响是重要途径。本综述介绍了常用于控制和监测纤维形成时间过程、以及检测伴侣蛋白与成纤维蛋...
Chapter 9: Oxidative stress in malignant progression: The role of Clusterin, a sensitive cellular biosensor of free radicals.
聚簇蛋白/载脂蛋白J（CLU）基因在多数人体组织中表达，编码分泌型糖蛋白和截短核型两种亚型。CLU参与多种生理过程，并与衰老、糖尿病、动脉粥样硬化、退行性疾病和肿瘤发生相关。这些疾病的共同点是活性氧或活性氮物种产生与清除失衡导致氧化损伤增加。细胞因子、生长因子、热休克、辐射、氧化剂和化疗药物等刺激也可差异调控CLU基因并促进活性物种...