The Journal of biological chemistry
2022
Raeburn CB, Ormsby AR, Cox D, Gerak CA 等 10 人
分子伴侣等质量控制机制可防止蛋白质错误折叠与聚集,但其在不同细胞区室中如何维持蛋白组折叠状态仍不清楚。本研究采用基于荧光共振能量转移(FRET)的策略,利用由原核核糖核酸酶 barnase 构建的“诱饵”生物传感器,检测人胚胎肾细胞 HEK293T 细胞核与细胞质中质量控制机制对错误折叠和聚集的保护能力。结果显示,barnase 生...
The FEBS journal
2016
Pastor A, Singh AK, Fisher MT, Chaudhuri TK
蛋白质折叠长期依赖溶液法,如溶解度、酶活、二级结构、FRET、NMR 和氢氘交换等,但快速分析常受聚集副反应影响。本文建立一种生物层干涉(BLI)分子伴侣检测系统,用于筛选变性蛋白的优良复性条件。通过监测无核苷酸高亲和 GroEL 与固定蛋白的结合,可实时反映固定蛋白随时间的折叠程度。GroEL 优先结合暴露疏水面的未折叠或部分折叠...
PloS one
2014
Stepanenko OV, Stepanenko OV, Staiano M, Kuznetsova IM 等 6 人
气味结合蛋白(OBP)因可作为有毒和爆炸物等危险物质光学生物传感器的构建模块而受到关注。天然组织提取的牛 OBP(bOBP)具有独特的二聚折叠模式,每个单体的 α 螺旋域跨越另一单体的 β 桶。重组 bOBP 保持了天然组织 bOBP 的高稳定性,但在缓冲液中二聚倾向降低,呈单体与二聚体混合物。本研究聚焦于重组 bOBP 在有无盐酸...