本研究评估了一种基于生物素化GroEL-链霉亲和素生物层干涉（GroEL-BLI）的自动化方法，用于检测多种药理学相关单克隆抗体（mAb）溶液中瞬时形成的前聚集体。利用该方法对IgG1和IgG4 mAb的聚集倾向进行排序，并对最不稳定IgG4 mAb施加高温、酸性pH及盐酸胍等应力。结果显示，GroEL-BLI主要在尺寸排阻色谱（S...
蛋白质折叠长期依赖溶液法，如溶解度、酶活、二级结构、FRET、NMR 和氢氘交换等，但快速分析常受聚集副反应影响。本文建立一种生物层干涉（BLI）分子伴侣检测系统，用于筛选变性蛋白的优良复性条件。通过监测无核苷酸高亲和 GroEL 与固定蛋白的结合，可实时反映固定蛋白随时间的折叠程度。GroEL 优先结合暴露疏水面的未折叠或部分折叠...
本文报道了一种基于分子伴侣GroEL的生物层干涉（BLI）检测方法，用于识别药理学相关蛋白的结构改变和/或聚集物种。研究首先优化了生物素化GroEL在链霉亲和素BLI传感器上的固定，并通过圆二色、ANS荧光、浊度和GFP重折叠实验证明天然与生物素化GroEL均保持稳定的结构和活性。以酸性成纤维细胞生长因子-1（FGF-1）为例，40...
布鲁氏菌对叙利亚公共卫生和畜牧业经济影响重大，因此亟需开发诊断与疫苗。此前作者从免疫骆驼中建立了广谱纳米抗体库，并筛选出布鲁氏菌特异性结合体 NbBruc02。蛋白组学提示其抗原为布鲁氏菌 60 kDa 热休克蛋白 GroEL/HSP-60。该抗原在布鲁氏菌感染巨噬细胞过程中的黏附与侵入中具有重要作用。本研究采用免疫层析法检测 Nb...
当前抗体难以区分布鲁氏菌（Brucella）与耶尔森菌（Yersinia）等近缘病原体，因为二者共享相同的脂多糖（LPS）O-链表位；同时布鲁氏菌病对公共卫生和畜牧业经济影响重大，亟需鉴定新的免疫原性蛋白以开发下一代疫苗。骆驼重链抗体来源的纳米抗体（Nanobody, Nb）具有小分子、高稳定性和强特异性，可用于感染性疾病研究。此前...