Development of an RNA aptamer as a therapeutic agent for synucleinopathies.
α-突触核蛋白（αSyn）的聚集与帕金森病、多系统萎缩和路易体痴呆等突触核蛋白病发病相关。αSyn 序列中的 KTKEGV 假重复（KR）是其类朊病毒样传播和神经退化的关键介导因素。目前尚无有效延缓疾病进展的治疗手段。本研究通过体外筛选获得一个 77 核苷酸 RNA 适配体 1R6，其以高亲和力和选择性结合 αSyn1-95。1R6...
A quantitative cell-based reporter links TDP-43 aggregation and dysfunction to define pathogenic mechanisms.
TDP-43 病理是肌萎缩侧索硬化（ALS）、额颞叶痴呆（FTD）和边缘系统为主年龄相关 TDP-43 脑病（LATE）等神经退行性疾病的标志。患者中胞质 TDP-43 聚集伴随核定位与功能破坏。TDP-43 是 RNA 结合蛋白，调控转录加工并抑制隐匿外显子剪接，其功能丧失导致基因表达失调。尽管重要，聚集与功能障碍的联系仍不清楚，...
The Effect of a Dodecahedron-Shaped Structure on the Properties of an Enzyme.
本研究考察了十二面体结构对辣根过氧化物酶（HRP）糖蛋白在云母基底上吸附行为的影响。实验将含 10^-7 M HRP 的 2 mM PBSD（pH 7.4）水溶液置于距金属化电木十二面体 0.03 m、2 m、5 m 处孵育，并以 20 m 为对照。孵育 40 min 后，将云母基底浸入相应溶液中进行直接吸附，再用原子力显微镜（AF...
Direct visualization and profiling of protein misfolding and aggregation in live cells.
近年来，活细胞中蛋白错误折叠与聚集的多步过程监测工具不断发展，该过程与阿尔茨海默病、帕金森病等多种人类疾病密切相关。本文综述了近期可用于检测蛋白聚集的方法进展：一方面，基于质谱的蛋白组学方法可在细胞裂解液或全细胞环境中评估蛋白构象与稳定性变化，如有限蛋白水解-质谱（LiP-MS）和基于氧化速率的蛋白稳定性（SPROX）；另一方面，基...
A Reporter System for Cytosolic Protein Aggregates in Yeast.
蛋白质错误折叠与聚集与哺乳动物神经退行性疾病及生物技术中异源蛋白表达不佳相关，因此监测蛋白聚集的工具对疾病研究和提高异源宿主可溶蛋白表达均有用。本研究基于酵母对错误折叠蛋白的内源响应，开发了一种用于细胞质聚集蛋白的启动子-报告系统。作者首先通过蛋白质组学比较酵母表达可溶折叠蛋白与聚集倾向蛋白诱饵的响应，鉴定到蛋白折叠、热应激响应及泛...
Characterization of Protein Aggregation Using Hydrogel-Encapsulated nIR Fluorescent Nanoparticle Sensors.
在生物制药工艺开发与生产阶段，对关键质量属性进行在线监测是实现过程分析技术（PAT）和质量源于设计（QbD）原则的必要条件。其中，监控并控制生物治疗药物制造过程中的蛋白聚集，对于防止不良免疫原性反应、降低对药物递送性的负面影响至关重要。本文研究了一种水凝胶封装、无标记近红外荧光纳米传感器，用于蛋白聚集表征。作者建立数学模型，描述一系...
Major Differences between the Self-Assembly and Seeding Behavior of Heparin-Induced and in Vitro Phosphorylated Tau and Their Modulation by Potential Inhibitors.
微管结合蛋白tau自组装为神经毒性寡聚体、纤维和成对螺旋丝，并在细胞间传播，是阿尔茨海默病及其他tau病的关键病理过程。调控tau自组装、抑制毒性聚集体形成与扩散是潜在治疗策略。体外研究tau自组装的难点在于tau在无翻译后修饰、聚集诱导剂或预成种子时不聚集；常用肝素等多聚阴离子诱导，但可能不能代表体内由异常磷酸化驱动的tau行为。...
Tau exhibits unique seeding properties in globular glial tauopathy.
tau病是一类以神经元和胶质细胞中微管相关蛋白tau异常聚集为特征的神经退行性疾病，其临床与病理异质性取决于tau亚型（3R或4R）及病理分布。球形胶质tau病（GGT）是一种罕见的4R tau病，以神经元和胶质细胞内球形胞质包涵体为特征。为判断GGT中tau是否具有独特生物学特性，作者利用商品化tau生物传感器细胞系对死后脑组织进...
The Chaperonin GroEL: A Versatile Tool for Applied Biotechnology Platforms.
无核苷酸状态的分子伴侣 GroEL 能够捕获因蛋白动态振动而产生的瞬态展开或部分展开状态。本文通过三个示例展示 GroEL 生物传感器生物层干涉（BLI）技术的进展，并扩展 GroEL 作为电子显微镜分子支架的用途。首先，作者将 GroEL-BLI 用于检测治疗蛋白溶液中的动态前聚集体瞬态，可评估折叠蛋白的动力学稳定性，并在野生型与...
Heat Shock Protein Reports on Proteome Stress.
蛋白质稳态（proteostasis）的精确调控是维持细胞适应性和存活的关键。蛋白组应激会破坏蛋白质稳态，导致蛋白错误折叠和聚集，并与神经退行性疾病、癌症和代谢紊乱等疾病密切相关。近年来，生物传感器领域发展了多种用于活细胞蛋白组应激检测的传感器，多数基于特定客户蛋白的亚稳态突变体，通过其聚集产生可测信号。然而，单一亚稳态蛋白难以代表...
Investigation of the effects of carbon-based nanomaterials on A53T alpha-synuclein aggregation using a whole-cell recombinant biosensor.
α-突触核蛋白（αS）是天然无序的突触前蛋白，其聚集是帕金森病（PD）及相关疾病发病的关键因素，其中前纤维和寡聚中间体对细胞具有毒性。本研究采用荧光素酶片段互补实验设计了一种“信号开启”型全细胞生物传感器，用于在活细胞内监测 A53T 突变型 αS 的寡聚化。随后，作者利用该传感器及体外实验考察了石墨烯量子点（GQDs）和氧化石墨烯...
Sensitive Detection of Proteopathic Seeding Activity with FRET Flow Cytometry.
越来越多的证据支持毒性蛋白聚集体或蛋白病理性种子在细胞间传播，是阿尔茨海默病及相关tau病等神经退行性疾病发病和进展的机制。tau种子的关键作用迫切需要灵敏检测生物样品中种子活性的方法。本研究将荧光共振能量转移（FRET）的特异性、流式细胞术的灵敏性和单克隆细胞系的稳定性相结合，建立超灵敏种子检测法，适用于重组样品和生物样品，包括人...
Probing structurally altered and aggregated states of therapeutically relevant proteins using GroEL coupled to bio-layer interferometry.
本文报道了一种基于分子伴侣GroEL的生物层干涉（BLI）检测方法，用于识别药理学相关蛋白的结构改变和/或聚集物种。研究首先优化了生物素化GroEL在链霉亲和素BLI传感器上的固定，并通过圆二色、ANS荧光、浊度和GFP重折叠实验证明天然与生物素化GroEL均保持稳定的结构和活性。以酸性成纤维细胞生长因子-1（FGF-1）为例，40...
Biosensor-based label-free assays of amyloid growth.
不可控的纤维状蛋白聚集与多种异常生物过程相关，因此发展定量体外检测对于在分子水平解析淀粉样生长及外源物种影响至关重要。本文综述了基于无标记技术的生物传感器方法，重点讨论石英晶体微天平（QCM）和表面等离子共振（SPR）在淀粉样纤维生长检测中的应用。传统方法依赖刚果红、硫黄素T等染料或荧光标记，存在染料结合化学计量、灵敏度、机制不清以...