Cell-Based Sensors for the Detection of EGF and EGF-Stimulated Ca
表皮生长因子(EGF)介导的表皮生长因子受体(EGFR)激活是癌症药物开发的重要靶点。现有体外方法虽可监测 EGF–EGFR 相互作用,但存在局限。本文报道一种活细胞传感器系统,用于监测 EGF 与 EGFR 的相互作用及其后续信号事件。EGF 检测传感细胞基于分裂内肽介导的条件蛋白跨切割反应(CPC)设计:目标 EGF 存在时触发...
表皮生长因子(EGF)介导的表皮生长因子受体(EGFR)激活是癌症药物开发的重要靶点。现有体外方法虽可监测 EGF–EGFR 相互作用,但存在局限。本文报道一种活细胞传感器系统,用于监测 EGF 与 EGFR 的相互作用及其后续信号事件。EGF 检测传感细胞基于分裂内肽介导的条件蛋白跨切割反应(CPC)设计:目标 EGF 存在时触发...
本研究报道了一种剪切水平表面声波(SH-SAW)生物传感器,通过生物分子在传感膜上的吸附量引起的频率偏移来测定其浓度。作者将3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)和戊二醛两种功能化传感膜用于捕获表皮生长因子(EGF)抗体,并结合数值模拟与实验比较,研究传感器灵敏度并建立估算癌症相关生物标志物EGF浓度的模型。在0.2–5 ng/mL...
尽管抗体在临床应用中广泛使用,但抗体–抗原相互作用的精确分子机制往往仍不清楚。本研究利用表面等离子共振(SPR)生物传感器的技术特点,解析单域抗体或纳米抗体与其靶抗原表皮生长因子(EGF)结合过程中的动力学与热力学组分。EGF 是参与肿瘤进展的关键致癌蛋白。作者通过精细调控实验条件,并将动力学数据转化为平衡常数,揭示了结合热力学全貌...
为优化用于血管应用的硫酸软骨素(CS)-表皮生长因子(EGF)抗凋亡涂层,作者比较了两种将 EGF 定向展示于 CS 表面的接枝策略。他们构建、纯化并表征了 N 端融合半胱氨酸和 Ecoil 螺旋肽的 EGF 嵌合蛋白 Cys-Ecoil-EGF。该蛋白可通过游离巯基共价固定,或通过 Ecoil/Kcoil 螺旋-螺旋相互作用非共价...
表面等离子共振(SPR)生物传感器可通过共振角(AR)变化实时、无标记地检测活细胞内信号事件。作者此前报道,角质形成细胞上表皮生长因子受体(EGFR)激活会引起独特的三相AR变化,而肥大细胞上IgE受体或腺苷A3受体激活仅引起短暂单相AR升高。为阐明EGFR激活诱导AR变化的机制,作者将野生型和突变型EGFR cDNA导入中国仓鼠卵...
表皮生长因子(EGF)可激活表皮生长因子受体(EGFR),在肿瘤靶向和再生医学中具有重要价值。本研究在大肠杆菌中表达并复性了 N 端融合 E5-coil 或 K5-coil 的人 EGF 融合蛋白(E5-coil-EGF 和 K5-coil-EGF)。融合蛋白以包涵体形式积累,经盐酸胍溶解、Ni-NTA 亲和纯化、半胱氨酸辅助氧化复...
为组织工程应用,将生长因子固定在细胞培养支架上可刺激细胞增殖并降低可溶性生长因子成本。为评估从头设计的 E/K 异源卷曲螺旋肽对用于表皮生长因子(EGF)接枝的潜力,作者利用哺乳动物细胞表达系统生产螺旋标记 EGF 嵌合体并纯化。通过体外细胞实验监测 EGFR 磷酸化,比较 E 或 K 螺旋类型对 EGF 生物活性的影响,并与 Ig...