Biotechnology advances
2017
Lin JL, Wagner JM, Alper HS
在菌株工程的“设计—构建—测试”循环中,快速产物检测与筛选策略仍是关键瓶颈,并限制整体通量。本文系统总结了多种将目标化学物浓度转换为易于测量的吸光度、发光和荧光信号的高通量检测模式。具体涵盖蛋白基生物传感器(包括转录因子、荧光蛋白和G蛋白偶联受体)、核酸基生物传感器(RNA核糖开关、RNA菠菜和DNA适配体)、偶联酶反应、生物正交化...
Current opinion in chemical biology
2015
Zhang J, Jensen MK, Keasling JD
在可持续生物经济中,许多大宗化学品和高价值化合物(包括药物)将由微生物细胞工厂利用可再生原料生产。通过构建多样化基因组库并筛选所需表型,可高效生成这些细胞工厂。然而,现有微生物基因组多样化方法远超筛选和选择最优性能变体的能力。遗传编码生物传感器能够响应小分子结合,并易于与高通量分析结合,有望弥补这一差距。本文综述了生物传感器开发的最...
Annual review of biochemistry
2010
Dietrich JA, McKee AE, Keasling JD
代谢工程用于高价值小分子过量生产,依赖定向进化提高产量。多数目标小分子无色且难以直接筛选。本文综述高通量比色、荧光和生长偶联筛选技术的发展,实现无色小分子检测。首先概述标准定向进化流程中文库构建、转化和筛选的通量限制,并基于小分子检测通量和灵敏度建立筛选与选择阶梯。随后深入分析已证明的小分子检测筛选与选择方法,重点介绍体内生物传感器...
Biotechnology and applied biochemistry
2009
Lundberg E, Brismar H, Gräslund T
c-Jun 是高度致癌转录因子,参与多种癌症发生。本研究从噬菌体展示的 Affibody 非免疫球蛋白支架蛋白文库中筛选结合 c-Jun 的亲和配体。在大肠杆菌中重组表达 c-Jun 同源二聚体,并通过 ELISA 验证其特异性结合含 c-Jun 应答元件的双链 DNA 发夹,不结合对照序列。经五轮噬菌体筛选,ZcJun518 在 ...