Cold Spring Harbor protocols
2015
Tisi R, Martegani E, Brandão RL
该方案描述利用水母 Aequorea victoria 的 aequorin 蛋白在活酵母细胞中监测胞内 Ca2+ 水平。待测酵母菌株需表达 A. victoria 的 apoaequorin 钙生物传感器,再与辅因子 coelenterazine 结合重构为有活性的 aequorin;酵母自身不能合成 coelenterazine...
Analytical and bioanalytical chemistry
2015
Weaver AA, Halweg S, Joyce M, Lieberman M 等 5 人
纸基分析装置可在实验室内外回答多种分析问题。本文首次利用酵母构建全细胞纸基生物传感器装置(BioPAD)。该生物基纸基分析装置对四环素类抗生素敏感,可用于药品质量控制及液体中抗生素污染检测。BioPAD 可在 30–10,000 μg/mL 范围内定性区分多西环素的存在或缺失。在对常用于疟疾预防的多西环素片剂进行分析时,BioPAD...
FEMS yeast research
2014
Smethurst DG, Dawes IW, Gourlay CW
细胞是否增殖、启动应激反应或进入凋亡,是维持健康细胞群的核心决定。在多细胞生物以及形成菌落的单细胞生物(如酵母)中,连接信号输入与细胞命运的细胞区室必须保持功能,以最大化适应性和存活能力。肌动蛋白细胞骨架参与膜微区室调控、受体内吞以及对主调控GTP酶的调控,因而处于细胞应答网络的中心位置;功能完整的肌动蛋白细胞骨架对于将环境信息高效...
Biochemical and biophysical research communications
2011
Hahn S, Schlenstedt G
进入或离开细胞核的货物通常由 importin β 家族受体介导,通过核孔复合体完成转运。酿酒酵母含有 14 个该家族成员,可分为 importin 和 exportin。Ran GTPase 通过其 GTP 结合状态调控受体与货物的结合、解离及转运方向,且受体仅在核内与 Ran-GTP 结合。本研究利用生物传感器测量了全部酵母转运...
The Journal of biological chemistry
2010
Jesch SA, Gaspar ML, Stefan CJ, Aregullin MA 等 5 人
蛋白激酶C(PKC)-MAPK 信号级联在酿酒酵母缺乏磷脂前体肌醇时被激活,并对细胞存活至关重要。本研究报道,通过肌醇饥饿或使用阻断鞘脂合成的试剂抑制含肌醇鞘脂代谢,可在不依赖鞘碱(DHS 和 PHS)积累的情况下触发 PKC 信号。在相同生长条件下,用于检测 PKC 信号必需中间产物磷脂酰肌醇-4-磷酸(PI4P)的荧光生物传感器...
Science (New York, N.Y.)
2010
Young BP, Shin JJ, Orij R, Chao JT 等 12 人
蛋白质对脂质的识别对于许多信号通路中蛋白质的靶向定位和功能激活至关重要,但调控这类蛋白-脂质相互作用的机制在很大程度上仍不清楚。本研究发现,蛋白质与广泛存在的信号脂质磷脂酸(PA)的结合不仅取决于PA的浓度,还强烈依赖于胞内pH以及PA磷酸头基的质子化状态。在酿酒酵母中,葡萄糖饥饿会迅速引起胞内pH下降,这种pH变化调控PA与转录因...