Molecular biology of the cell
2015
Ambrosio AL, Boyle JA, Di Pietro SM
血小板致密颗粒(PDG)是酸性钙储存器,对正常止血至关重要。它们由晚期内体区室通过囊泡运输接收 PDG 特异性蛋白而发育,但成熟机制尚不清楚。本文证明双孔通道 2(TPC2)是 PDG 膜组分,可调节 PDG 腔内 pH 和可释放 Ca2+ 池。作者利用遗传编码 Ca2+ 生物传感器和 TPC2 孔突变体,阐明 TPC2 在 PDG...
Scientific reports
2015
Wang L, Wang R, Kong BW, Jin S 等 7 人
针对食源性致病菌大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7)快速、灵敏检测的需求,本研究报道了一种基于B细胞钙信号的特异性检测方法。将膜表面锚定抗E. coli O157:H7 IgM单克隆抗体的MARC 29F8杂交瘤B细胞预先负载钙离子荧光指示剂Fura-2/AM,置于96孔板中。当目标菌与B细胞表...
Cilia
2015
Lee KL, Guevarra MD, Nguyen AM, Chua MC 等 6 人
初级纤毛是多数哺乳动物细胞表面的非运动性天线状结构,在软骨、骨和肾等组织的化学与机械感知中起关键作用。肾上皮中流致细胞内钙离子升高依赖初级纤毛及纤毛定位的钙通透通道多囊蛋白-2(PC2)和瞬时受体电位香草酸4(TRPV4),但骨细胞机械转导的分子机制尚不清楚。作者将基于荧光共振能量转移(FRET)的钙离子生物传感器与初级纤毛特异性蛋...
PloS one
2015
Nishitani WS, Alencar AM, Wang Y
本研究开发了一种基于细胞基底形变的机械刺激装置和一种更灵敏的细胞黏附测量方法。精确定位于细胞附近的探针可实现垂直局部机械刺激,频率约207 Hz,应变幅度约50%。该装置用于检测人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的钙信号响应。细胞内钙离子浓度通过基因编码的Cameleon生物传感器测量,同时抑制瞬时受体电位阳离子通道M亚家族成员7(T...
The Journal of investigative dermatology
2015
Lee SE, Kim JM, Jeong SK, Choi EH 等 6 人
蛋白酶激活受体-2(PAR-2)可作为蛋白酶的天然生物传感器,并调控皮肤多种功能,但其在皮脂细胞中的表达与作用尚不清楚。本研究在 SZ95 人源皮脂细胞中于 mRNA 和蛋白水平鉴定了 PAR-2 表达。PAR-2 激动肽或痤疮丙酸杆菌(P. acnes)培养上清可诱导细胞内 Ca2+ 动员,表明 P. acnes 是皮脂细胞 PA...
Cell calcium
2015
Zhang XH, Wei H, Šarić T, Hescheler J 等 6 人
发育心肌细胞的核心特性是能够自发跳动,但其机制是否类似成人心脏尚未直接验证。本研究在人诱导多能干细胞来源心肌细胞(hiPS-CM)和大鼠新生心肌细胞(rN-CM)中,通过全细胞/穿孔膜片钳和二维共聚焦成像,比较肌浆网与线粒体钙信号及If通道对自发节律的贡献。结果显示:两类细胞在24℃下均自发跳动(60–140次/分);将膜电位钳制在...
Cold Spring Harbor protocols
2015
Tisi R, Martegani E, Brandão RL
该方案描述利用水母 Aequorea victoria 的 aequorin 蛋白在活酵母细胞中监测胞内 Ca2+ 水平。待测酵母菌株需表达 A. victoria 的 apoaequorin 钙生物传感器,再与辅因子 coelenterazine 结合重构为有活性的 aequorin;酵母自身不能合成 coelenterazine...