铜绿假单胞菌临床分离株中多重耐药现象日益严重，亟需寻找抗生素替代策略以控制该类病原菌感染。本研究将韦氏芽孢杆菌 P65 的 ahl-1 乳酰酶基因克隆至 pET22b 载体，并在大肠杆菌 BL21(DE3) 中 T7 启动子控制下异源表达，利用其群体感应淬灭活性对抗三株多重耐药铜绿假单胞菌临床分离株。以己酰高丝氨酸内酯（HHL）为底...
本文基于DNA杂交和荧光共振能量转移（FRET）设计了一种用于快速检测铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）的荧光适配体传感器。在无目标菌时，5-羧基荧光素标记的互补DNA（FAM-cDNA）与适配体部分序列杂交，形成的复合物通过适配体单链侧翼吸附在氧化石墨烯量子点（GOQDs）表面，使FAM靠近GOQDs并发...
铜绿假单胞菌是伤口感染的重要病原体，其毒力因子产生和生物膜形成受多种群体感应（QS）系统调控，因此 QS 被视为治疗该菌感染的潜在靶点。本研究评估植物源 QS 抑制剂香豆素对铜绿假单胞菌生物膜和毒力的影响。香豆素在 P. aeruginosa QSIS2 生物传感器菌株中抑制 QS，降低蛋白酶和绿脓菌素产生，并在不同菌株中抑制 96...
2-氨基苯乙酮（2-AA）是机会致病菌铜绿假单胞菌大量产生的挥发性分子。此前研究证明 2-AA 可激活费氏弧菌群体感应 LuxR 受体。本研究通过易错 PCR 对 luxR 进行随机突变，筛选获得 LuxR-M22 受体，其结合口袋三个氨基酸发生点突变（Asp72Gly、Val102Ile、Met135Thr），提高了 LuxR 对...
铜绿假单胞菌可致烧伤患者及其他免疫功能低下者发生院内感染，但传统诊断依赖耗时的培养方法。为此，作者开发了一种基于多重交叉置换扩增（MCDA）和金纳米颗粒侧流生物传感器（LFB）快速、灵敏检测铜绿假单胞菌的方法。该方法在优化恒温 67°C 下仅需 40 min 即可完成反应，扩增产物可通过 LFB 目视检测，无需特殊设备。P. aer...
比色DNA检测因无需昂贵仪器而优于其他临床分子诊断方法。本研究基于金纳米颗粒（GNPs）和内切酶建立比色法检测铜绿假单胞菌外毒素A（ETA）基因。首先设计并合成针对ETA基因的引物和探针，并通过PCR验证特异性；随后用柠檬酸还原法合成GNPs，并与探针偶联构建新型纳米生物传感器。将细菌提取的目标DNA加入GNP-探针复合物中，当GN...
针对环境病原菌入侵引发的宿主免疫应答复杂且动态，传统琼脂平板方法难以在单只动物水平实现可控感染与长期实时监测。本研究提出一种集成微流控装置与线虫生物传感器，用于在活体秀丽隐杆线虫（C. elegans）中研究动态免疫反应及抗生素干扰。芯片由双层聚二甲基硅氧烷（PDMS）微流控结构组成，下层设置多个独立线虫培养腔、装载通道和树状细菌/...
在复杂背景流体中低浓度检测细菌代谢物，可用于呼吸道感染生物标志物识别和污染医疗器械筛查。表面增强拉曼散射（SERS）结合等离子体纳米间隙可在无标记条件下达到痕量分子检测限，但制备大面积、均匀纳米间隙器件仍困难。本文采用化学组装策略，在双嵌段共聚物模板上构建金纳米球寡聚体，通过交联剂长度控制纳米球间隙，获得均匀 SERS 信号。该表面...
本研究旨在从海洋来源真菌中筛选群体感应（quorum sensing, QS）抑制剂，并评价其对铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）的抗 QS 活性。作者以铜绿假单胞菌 QSIS-lasI 生物传感器对海洋真菌次级代谢产物进行筛选，发现海洋真菌 Fusarium sp. Z10 的提取物具有 QS 抑制活性。...
铜绿假单胞菌是多种慢性感染的重要病原菌，其生物膜形成能力使其成为机会性病原体并增强对抗微生物/抗生素治疗的耐受。来自海洋藻类的低分子量海藻寡糖 OligoG CF-5/20 此前被报道可损害铜绿假单胞菌生物膜运动性并破坏生物膜组装。由于这些表型受群体感应（QS）调控，作者假设 OligoG CF-5/20 可能改变其 QS 信号。采...
理解抗生素耐药性在细菌病原体中传播的关键瓶颈之一，是获得耐药性对微生物生理功能的影响。群体感应（quorum sensing, QS）是细菌重要的种内和种间通讯系统，参与毒力、生物膜形成及宿主互作等过程。已有研究表明，获得抗生素耐药性可能损害 QS 反应，某些抗生素如抗菌肽也可影响 QS 信号分子的产生与积累。鉴于 QS 在人体宿主...
感染诊断领域迫切需要更简便、易用的检测工具，但细菌培养仍是金标准。本文提出一种替代方案，证明全细胞细菌生物传感器可高效检测外耳道炎患者中的铜绿假单胞菌感染。检测基于生物传感器与铜绿假单胞菌大量产生的挥发性化合物2-氨基苯乙酮（2-AA）之间的特异性结合。研究收集26名外耳道炎症状受试者的耳部脓液，将生物传感器检测结果与金标准培养法及...
群体感应（QS）是抑制铜绿假单胞菌宿主适应性和致病性的有前景靶点。过去十年，许多研究聚焦于筛选具有抗QS活性的小分子或蛋白，主要靶向以N-3-氧代十二酰基高丝氨酸内酯（3OC12-HSL）为信号分子的las QS系统。已有多种实验方法用于鉴定干扰3OC12-HSL受体LasR活性/稳定性、合成酶LasI功能，或信号分子本身稳定性/生...
2-烷基-4-喹诺酮（2-alkyl-4-quinolones, AQs）如 2-庚基-3-羟基-4-喹诺酮（PQS）和 2-庚基-4-羟基喹啉（HHQ）是铜绿假单胞菌群体感应信号分子。本文介绍两种基于 lux 生物发光报告菌的 AQ 检测与定量方法：薄层色谱（TLC）法和微孔板法。TLC 法中，细菌细胞或培养上清的有机溶剂提取物在...
本研究基于标准多重交叉置换扩增（MCDA）开发了一种新型等温核酸检测技术，并引入自避免分子识别系统（SAMRS）组分与南极热敏感尿嘧啶-DNA糖基化酶（AUDG），命名为AUDG–SAMRS–MCDA。为实现扩增产物在试纸条上的检测，作者建立了无需标记引物或探针的分析策略，从而避免标记引物之间或标记探针与引物之间非预期杂交造成的假阳...
合成生物学设计的无细胞生物传感器是检测感染性疾病临床相关生物标志物的新工具。本文报道了一种模块化 DNA 编码生物传感器，可在无细胞蛋白表达系统中用于检测铜绿假单胞菌感染的人痰样细菌生物标志物。作者通过优化无细胞体系和样品提取方法，证明囊性纤维化患者肺部分泌物中的群体感应分子 3-氧代-C12-高丝氨酸内酯（3-oxo-C12-HS...
铜绿假单胞菌的群体感应（QS）系统通过自诱导物调控毒力因子和致病性，是抗感染干预的重要靶点。本研究考察了手性吡哆醛乳酸腙（pyridoxal lactohydrazone，PLH）在亚抑菌浓度下对铜绿假单胞菌PAO1 QS相关毒力因子的影响。PLH由手性乳酸酰肼与吡哆醛反应制得。在1/4和1/16 MIC（32和8 µg/mL）处理...
近期研究表明，环二鸟苷酸（cyclic di-GMP, c-di-GMP）是细菌中重要的第二信使，调控多种生理功能，尤其作为黏附和生物膜形成的正调控因子受到广泛关注。深入了解其调控机制有助于开发工业和医疗环境中控制生物膜的策略。因此，在特定条件或特定突变株中测量细菌 c-di-GMP 水平具有重要意义。作者开发了一系列基于荧光的 c...
群体感应（QS）是细菌依赖细胞密度的毒力基因调控系统。本研究评估5种酚类化合物（甲基没食子酸MG、焦性没食子酸、邻苯二酚、间苯二酚、间苯三酚）对紫色毛杆菌和铜绿假单胞菌AHL介导QS及毒力因子的影响。利用紫罗兰素生物传感器菌株筛选，仅MG显示显著抗QS活性。进一步研究表明，MG在亚抑菌浓度下抑制C. violaceum中C6-HSL...
多重耐药菌常通过细胞间通讯诱导生物膜形成以增强耐药性。抑制群体感应（QSI）是预防生物膜形成的有效策略。作者从沿海盐碱地莎草属植物 Cyperus laevigatus 根际分离出革兰阴性菌 Delftia tsuruhatensis SJ01。SJ01 培养物及粗提物在含参考菌株 Chromobacterium violaceum...