Neuron
2018
Wang D, Berg DJ, Scherrer G
本文评论了 Stoeber 等利用遗传编码荧光构象生物传感器解析活神经元中阿片受体激活时空组织的研究。阿片受体(MOR、DOR、KOR)介导内源肽与外源药物作用,但其激活后的亚细胞定位与信号机制长期不清。作者将可稳定 MOR 激活态的 Nb33 纳米抗体与 GFP 融合,构建 OR sensor,使其仅在配体结合激活态受体上产生荧光...
Molecular biology of the cell
2017
Herrington KA, Trinh AL, Dang C, O'Shaughnessy E 等 8 人
小 GTP 酶 Cdc42 调控多种细胞过程的能力依赖于其活性的严格空间控制。Cdc42 功能在质膜(PM)研究最充分,可调控细胞骨架和细胞极性;活性 Cdc42 也存在于高尔基体,但其在高尔基体的作用与调控机制仍不完全清楚。本研究利用 Cdc42 FLARE 生物传感器,结合荧光寿命成像(FLIM)-FRET 的 phasor 分...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2016
Song L, Bachert C, Linstedt AD
黏蛋白型O-糖基化是高尔基体中重要的蛋白质翻译后修饰,由多达20种GalNAc转移酶亚型启动,各亚型具有不同的底物特异性。该酶家族调控大量分泌途径蛋白,其失调与多种人类疾病相关。本文介绍一种在分泌途径中转运的蛋白基荧光传感器,用于在活细胞中监测GalNAc转移酶活性。传感器可设计为广谱(pan)或亚型特异性。其结构包含荧光激活蛋白(...
Cell death and differentiation
2016
Zhou H, Sauvat A, Gomes-da-Silva LC, Durand S 等 18 人
LTX-401是一种具有潜在免疫原性的溶瘤氨基酸衍生物。本研究证明,LTX-401可选择性破坏高尔基体结构,该结论基于超微结构分析以及对表达高尔基体靶向GFP报告蛋白细胞的荧光显微镜观察。亚细胞分级分离联合质谱检测显示,LTX-401选择性富集于高尔基体,而非线粒体或胞质。高尔基体解离剂Brefeldin A(BFA)可降低LTX-...
Traffic (Copenhagen, Denmark)
2013
Bachert C, Linstedt AD
蛋白O-糖基化可通过O-糖链遮蔽调控新生蛋白的蛋白水解加工位点。为建立适用于大规模筛选的检测方法,作者构建了一种荧光生物传感器,其O-糖基化位点紧邻furin切割位点。正常O-糖基化时,糖链遮蔽furin位点,furin不能切割连接肽,阻断域使FAP无法结合染料,传感器无荧光;O-糖基化失败或受抑制时,furin切割连接肽并释放阻断...