Development of a Novel ATP Bioluminescence Assay Based on Engineered Probiotic
三磷酸腺苷（ATP）定量分析在食品、生物技术和诊断领域应用广泛，且炎症性肠病（IBD）等疾病的发生发展与高 ATP 水平密切相关。目前，基于 D-荧光素/荧光素酶体系的生物发光法因灵敏度和特异性高而成为 ATP 检测的常用方法，但传统方法依赖重组大肠杆菌表达并纯化萤火虫荧光素酶（FLuc），成本较高。本研究旨在开发无需提取和纯化 F...
High-resolution detection of ATP release from single cultured mouse dorsal horn spinal cord glial cells and its modulation by noradrenaline.
本研究将稳定转染大鼠P2X2受体亚基的人胚胎肾293细胞（HEK293-P2X2）与200 nM孕酮（PROG）预孵育，构建HEK293-P2X2-PROG嗅探细胞/生物传感器。PROG是同源P2X2受体的强效正变构调节剂，可显著提高细胞对低纳摩尔胞外ATP的检测能力。将负载Fura-2的HEK293-P2X2-PROG细胞急性铺于...
Development of a microfluidic cell-based biosensor integrating a millisecond chemical pulse generator.
细胞基生物传感器的应用常受细胞表面受体在激动剂持续刺激下发生脱敏的限制。本文报道了一种用于液体环境中检测三磷酸腺苷（ATP）的微流控细胞基生物传感器（μCBB）。该传感器集成了毫秒级化学脉冲发生器，并以单个表达内源性 P2Y 受体的 NIH-3T3 细胞作为识别元件。研究采用 ATP 溶液模拟输入信号，通过控制十字形微流控芯片两个出...
Released nucleotides amplify the cilium-dependent, flow-induced [Ca2+]i response in MDCK cells.
目的：灌流液流动变化可升高肾上皮细胞内钙浓度，培养肾上皮细胞需初级纤毛感知细微流动变化；在灌流肾小管中该流动反应由核苷酸经P2Y2受体介导，但机械应力作用于初级纤毛是否释放核苷酸尚不清楚。本研究检测纤毛依赖的流动反应中是否释放核苷酸并参与流动诱导的钙信号。方法：MDCK细胞装载Fluo-4-AM，在37℃半开放单室或封闭双室灌流系统...