10.3389/fpls.2022.1075838
松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)引起松枯病,是全球松树最具破坏性的病害之一,因此快速准确检测对防控至关重要。传统方法费时且依赖昂贵仪器。本研究将环介导等温扩增(LAMP)与 CRISPR 技术结合,建立用于松材线虫的智能检测与分析系统 LAMP-CRISPR/Cas12a,整合现场采样、快速检测和智能...
松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)引起松枯病,是全球松树最具破坏性的病害之一,因此快速准确检测对防控至关重要。传统方法费时且依赖昂贵仪器。本研究将环介导等温扩增(LAMP)与 CRISPR 技术结合,建立用于松材线虫的智能检测与分析系统 LAMP-CRISPR/Cas12a,整合现场采样、快速检测和智能...
本文提出一种可控crRNA自转录辅助的双放大CRISPR-Cas12a策略(CST-Cas12a),用于高灵敏、高特异检测真核细胞中结构选择性核酸酶FEN1(flap endonuclease 1)活性。该策略设计含5′突出flap的分支DNA探针作为FEN1水解底物;FEN1切割产生的flap与模板探针退火,并作为引物启动延伸反应...
本研究开发了一种基于双功能哑铃探针的荧光生物传感器,用于肺癌细胞和组织中微小RNA(miRNA)的级联放大检测。该传感器将引物交换反应(PER)与CRISPR-Cas12a系统整合:目标miR-486-5p与哑铃探针结合后暴露引物结合区,短引物在Bst large fragment DNA聚合酶作用下延伸,并通过分支迁移释放探针,循...
玉米赤霉烯酮(ZEN)对人和动物有害,发展快速灵敏检测方法很重要。本文提出一种基于双适配体识别和 EnGen LbaCas12a 与 Nt.AlwI 切口内切酶双重信号放大的 ZEN 荧光监测方法。当 ZEN 存在时,与适配体 Z0 结合,使 Z1 释放到溶液中;经磁分离后加入 Nt.AlwI,形成切口酶循环,30 min 内产生大...
8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶对维持基因组稳定性至关重要,其活性异常可扰乱DNA损伤修复并增加致癌致畸风险。本文构建基于CRISPR-Cas的荧光生物传感器,用于快速灵敏检测8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶。该传感器采用发夹探针,将二次链置换扩增(SDA)与CRISPR/Cas12a效应器结合,40 min内等温完成。酶存在时,PNK辅助...