本文报道了一种名为LACD的CRISPR核酸检测平台，将环介导等温扩增（LAMP）与CRISPR-Cas12a介导的诊断相结合。作者将常规LAMP核心引物（FIP或BIP）的连接区工程化，引入PAM序列TTTT，使LAMP扩增产物含有可被CRISPR-Cas12a识别的特异PAM位点。在检测阶段，LAMP产物与gRNA/Cas12a...
尽管CRISPR-Cas12a系统有助于提高发光生物传感器的检测准确性和设计灵活性，但将其应用于更多目标物种并增强在复杂生物介质中的适应性仍具挑战。本文提出两种策略：首先引入简单的功能DNA（fDNA）调控通路，通过激活Cas12a独特的反式切割效应，使传感器能够分别利用双适配体和DNAzyme有效转导蛋白质和金属离子；其次采用长余...
核酸生物标志物广泛用于病毒相关疾病检测。CRISPR-Cas反式激活现象可用于核酸高灵敏、高选择性检测，但通常需要PCR、RPA或LAMP等扩增步骤，流程复杂且可能假阳性。作者开发基于CRISPR-Cas12a的无核酸扩增生物传感器，并与表面增强拉曼光谱（SERS）系统结合。病毒DNA激活Cas12a后，切割连接拉曼探针功能化金纳米...
本研究报道了一种由CRISPR-Cas12a驱动的双模式生物传感器，用于病原菌的超灵敏和交叉验证检测。以沙门氏菌为模型，其特异性invA基因经PCR扩增后，由crRNA引导LbCas12a识别目标双链DNA并激活反式切割活性，非特异性降解原本用于连接两对金纳米颗粒（AuNP）探针的linker ssDNA，使AuNPs由聚集态转变为...
本文报道了一种由腙连接辅助的DNAzyme行走纳米机器与CRISPR-Cas12a反式切割偶联的级联信号放大荧光生物传感器，用于检测脂多糖（LPS）。完整行走链被拆分为肼基修饰的ASI和醛基修饰的ASII，其中ASII为8-17 DNAzyme片段并被LPS适配体LPSA锁定。LPS与LPSA竞争结合后释放ASII，ASII与固定在...
本研究利用 Cas12a 高效无差别单链 DNA 切割活性，并结合亚甲基蓝（MB）标记探针（短寡核苷酸/单核苷酸）向带负电氧化铟锡（ITO）电极的扩散差异，构建了一种简单、免固定、高灵敏的同相电化学生物传感器，用于检测人乳头瘤病毒 16 型（HPV-16）。检测核心是 Cas12a 的 ssDNA 反式切割能力：MB 标记短寡核苷酸...
本文提出用金属有机框架（MOF）保护 CRISPR-Cas12a 酶/RNA 复合物，以增强其环境耐受性并便于快速释放。作者以 Cas12a/crRNA 为模型，利用 2-甲基咪唑（2-MIM）与 Zn2+ 自组装形成 ZIF-8 包覆复合物，得到粒径 400–600 nm 的 Cas12a/crRNA@ZIF-8 纳米复合材料，包...
幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, H. pylori）的非侵入性检测在临床实践中具有重要意义，但现有方法多依赖昂贵设备或流程复杂，难以用于流行病学调查。本研究旨在建立一种基于CRISPR-Cas12a技术、可靠、快速且经济的非侵入性方法，用于粪便标本中H. pylori的检测。作者建立了新型CRISPR-Cas1...
CRISPR-Cas12a（Cpf1）可反式切割单链DNA，该特性已被广泛用于核酸检测。本文提出一种新型Cas12a报告子——G-三链体（G-triplex，G3），并构建高灵敏生物传感器G-CRISPR。作者证明激活的Cas12a可在约10 min内反式切割G3结构，且切割导致高级结构破坏，使G3成为优良报告子。G3报告子将分析灵...
比色法因操作简便、可肉眼观察颜色变化而受到关注，但高灵敏度比色传感方法仍具挑战。本文基于CRISPR-Cas12a、滚环扩增（RCA）和金纳米颗粒（AuNPs）的催化活性，构建了一种用于高灵敏检测黄曲霉毒素M1（AFM1）的比色适配体传感器。当样品中存在AFM1时，AFM1适配体与AFM1结合，使CRISPR-Cas12a失活，Au...
分子诊断对疾病识别、预防和治疗至关重要，尤其在即时检测（POC）场景中需求突出。然而，多数基于CRISPR-Cas系统的生物传感器主要针对核酸靶标。本文报道一种用于小分子诊断的通用策略，称为分子雷达（Molecular Radar）。该策略基于CRISPR-Cas12a辅助荧光报告系统，由Cas12a蛋白、CRISPR RNA（cr...
2019冠状病毒病（COVID-19）由SARS-CoV-2引起并引发全球大流行。本文将多重交叉置换扩增（MCDA）与CRISPR-Cas12a检测结合，开发新型诊断方法MCCD，用于SARS-CoV-2检测。该方法先对RNA模板进行逆转录MCDA（RT-MCDA），再由CRISPR-Cas12a/CrRNA复合物识别预定义靶序列，...
唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素（Siglec）是细胞表面 I 型跨膜受体，其中 Siglec-5 作为白细胞抑制性受体，在正常髓系造血和急性髓系白血病等过程中具有潜在标志物价值。本文利用催化发夹组装（CHA）等温放大策略，结合 CRISPR-Cas12a 的反式切割活性，构建了基于二维超薄 Ti3C2Tx（MXene）的电化学发光（E...
严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）在全球快速传播，给疫情防控带来严峻挑战。现有核酸检测和免疫检测方法多依赖专业仪器、训练有素的操作人员和集中实验室，便携性和实用性受限。本文开发了一种基于CRISPR-Cas12a的便携式、快速、高灵敏SARS-CoV-2检测方法。样品经快速预处理后，在温和条件下通过逆转录重组酶辅助...
无细胞DNA（cfDNA）因在癌症等疾病诊断中的潜力受到关注，但基于扩增方法的检测存在假阳性及靶标特异性引物设计困难等局限；已报道的CRISPR-Cas荧光生物传感器通常仍需扩增步骤。本研究首次开发了一种基于CRISPR-Cas12a的无核酸扩增荧光生物传感器，利用DNA功能化金纳米颗粒（AuNP）实现金属增强荧光（MEF）检测cf...