ACS pharmacology & translational science
2024
Bathla P, Mujawar A, De A, Sandanaraj BS
在活体系统中以极高特异性进行非侵入、实时、纵向蛋白质功能成像，是现代生物医学研究的关键挑战之一。本文报道了一种名为活性蛋白谱-生物发光共振能量转移（ABPP-BRET）的平台融合技术。该方法将活性蛋白谱（ABPP）与生物发光共振能量转移（BRET）相结合，可在活细胞中以实时、纵向方式监测目标蛋白的翻译后修饰与酶活性变化。作者以半合成...
Scientific reports
2023
Arakawa M, Yoshida A, Okamura S, Ebina H 等 5 人
蛋白酶在凋亡、炎症和病毒蛋白成熟等过程中发挥关键作用，但现有蛋白酶生物传感器难以从低水平内源蛋白酶获得可靠信号。本研究基于 Oplophorus gracilirostris NanoLuc 荧光素酶开发了高灵敏蛋白酶生物传感器 FlipNanoLuc。该传感器将 NanoLuc 拆分为 LgBiT（β1–8）、β9 和 HiBiT...
Biochemical and biophysical research communications
2014
Shi J, Zhang H, Fang L, Xi Y 等 9 人
Caspase-3 激活是检测凋亡的关键替代标志物。为定量检测 caspase-3 活性，作者构建了含 caspase-3 切割位点的重组萤火虫荧光素酶生物传感器。当凋亡被诱导时，caspase-3 切割该生物传感器，使萤火虫荧光素酶活性提高 25 倍以上。该检测可方便地实时检测凋亡，有助于药物发现。作者筛选结核分枝杆菌 ESAT-...
Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy
2011
Niers JM, Kerami M, Pike L, Lewandrowski G 等 5 人
非侵入性检测与体内成像凋亡在癌症等多种疾病治疗开发中至关重要。作者将绿色荧光蛋白（GFP）融合到天然分泌型 Gaussia 荧光素酶（Gluc）N 端，中间以 caspase-3 切割肽 DEVD 连接，构建凋亡生物传感器。该融合蛋白以无活性形式滞留于胞质；凋亡发生时，激活的 caspase-3 切割 DEVD，释放含信号肽的 ss...